猪流行性腹泻病毒抗体酶免疫分析试剂盒使用说明书

猪 流 行 性 腹 泻 病 毒 抗 体 （ P E D V - A b ） 酶 联 免 疫 分 析  

试 剂 盒 使 用 说 明 书  

本 试 剂 盒 仅 供 研 究 使 用 。  

检 测 范 围 ：                                                                                                                     9 6 T  

1 5   U / L   - 4 0 0   U / L  

使 用 目 的 ：  

本 试 剂 盒 用 于 测 定 猪 血 清 、 血 浆 及 相 关 液 体 样 本 中 流 行 性 腹 泻 病 毒 抗 体 （ P E D V - A b ）

含 量 。  

实 验 原 理  

本 试 剂 盒 应 用 双 抗 原 夹 心 法 测 定 标 本 中 猪 流 行 性 腹 泻 病 毒 抗 体 （ P E D V - A b ） 水 平 。 用

纯 化 的 猪 流 行 性 腹 泻 病 毒 抗 原 包 被 微 孔 板 ， 制 成 固 相 抗 原 ， 往 包 被 的 微 孔 中 依 次 加 入 流 行 性

腹 泻 病 毒 抗 体 （ P E D V - A b ） ， 再 与 H R P 标 记 的 流 行 性 腹 泻 病 毒 抗 原 结 合 ， 形 成 抗 原 - 抗 体 - 酶

标 抗 原 复 合 物 ， 经 过 彻 底 洗 涤 后 加 底 物 T M B 显 色 。 T M B 在 H R P 酶 的 催 化 下 转 化 成 蓝 色 ，

并 在 酸 的 作 用 下 转 化 成 zui 终 的 黄 色 。 颜 色 的 深 浅 和 样 品 中 的 流 行 性 腹 泻 病 毒 抗 体

（ P E D V - A b ） 呈 正 相 关 。 用 酶 标 仪 在 4 5 0 n m 波 长 下 测 定 吸 光 度 （ O D 值 ） ， 通 过 标 准 曲 线 计

算 样 品 中 猪 流 行 性 腹 泻 病 毒 抗 体 （ P E D V - A b ） 浓 度 。    

试 剂 盒 组 成    

1   3 0 倍 浓 缩 洗 涤 液   2 0 m l × 1 瓶   7   终 止 液   6 m l × 1 瓶  

2   酶 标 试 剂   6 m l × 1 瓶   8   标 准 品 （ 8 0 0   U / L ）   0 . 5 m l × 1 瓶  

3   酶 标 包 被 板   1 2 孔 × 8 条   9   标 准 品 稀 释 液   1 . 5 m l × 1 瓶  

4   样 品 稀 释 液   6 m l × 1 瓶   1 0   说 明 书   1 份  

5   显 色 剂 A 液   6 m l × 1 瓶   1 1   封 板 膜   2 张      

6   显 色 剂 B 液   6 m l × 1 / 瓶   1 2   密 封 袋   1 个  

标 本 要 求    

1 ． 标 本 采 集 后 尽 早 进 行 提 取 ， 提 取 按 相 关 文 献 进 行 ， 提 取 后 应 尽 快 进 行 实 验 。 若 不 能

马 上 进 行 试 验 ， 可 将 标 本 放 于 - 2 0 ℃ 保 存 ， 但 应 避 免 反 复 冻 融  

2 ． 不 能 检 测 含 N a N 3 的 样 品 ， 因 N a N 3 抑 制 辣 根 过 氧 化 物 酶 的 （ H R P ） 活 性 。  

操 作 步 骤  

1 .   标 准 品 的 稀 释 ： 本 试 剂 盒 提 供 原 倍 标 准 品 一 支 ， 用 户 可 按 照 下 列 图 表 在 小 试 管 中 进 行 稀

释 。  

4 0 0   U / L   5 号 标 准 品   1 5 0 μ l 的 原 倍 标 准 品 加 入 1 5 0 μ l 标 准 品 稀 释 液  

2 0 0   U / L   4 号 标 准 品   1 5 0 μ l 的 5 号 标 准 品 加 入 1 5 0 μ l 标 准 品 稀 释 液  

1 0 0   U / L   3 号 标 准 品   1 5 0 μ l 的 4 号 标 准 品 加 入 1 5 0 μ l 标 准 品 稀 释 液  

5 0   U / L   2 号 标 准 品   1 5 0 μ l 的 3 号 标 准 品 加 入 1 5 0 μ l 标 准 品 稀 释 液  

2 5   U / L   1 号 标 准 品   1 5 0 μ l 的 2 号 标 准 品 加 入 1 5 0 μ l 标 准 品 稀 释 液