当前位置:上海抚生实业有限公司>>技术文章>>探究ELISA检测发生“花板”原因
所谓ELISA检测“花板",就是空白、阴阳性对照及室内质控孔结果正常,而标本孔的OD值却偏高。之所以空白、对照及质控结果正常而标本孔异常,是因为样品本身的原因,大部分或全部标本孔的OD值偏高,很可能是因为样品中某些共有的物质非特异性的吸附于固相载体,而在实验的过程中未被除去。
1、待测血清中混有红细胞或纤维蛋白原 这两种物质易沉淀或附着在聚乙烯孔内不易洗净,实验表明在较高的离心转速(3000 /min)和较长的离心时间(>10 min)之下,血液标本被充分地离心分离之后,使红细胞和纤维蛋白充分沉淀,可以在加样时避免加入红细胞和纤维蛋白,避免这两种干扰物质对实验结果的影响,就可避免“花板"情况。
2、 高IgG血症 在实际工作中,笔者发现,检测丙肝的实验出现花板的情况较多,原因之一是因为目前国内外的抗-HCV EIA试剂均采用间接酶联免疫检测原理,间接法的一个重要影响因素是血清中所含的高浓度的非特异性IgG,IgG对聚苯乙烯有较强的吸附力,非特异性IgG可吸附到固相载体上或包被的抗原上造成假阳性。
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