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PCR试剂盒技术的特点

时间:2021/4/22阅读:319
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PCR试剂盒技术特点:

1准确可靠,临床双盲对照试验>1000例,结果与金标准测序法比对,结果*性大于99%。

2高灵敏:可检测低至10ng的人基因组DNA。

3快速:整个检测流程只需3小时。

4简便:试剂盒提供预混好的试剂,使体系配置操作简便。

5防污染

6高特异性:双重特异性组成,保证检测结果的特异性和准确性引物与DNA互补链结合必需*配对,才能延伸。探针特异性与所检测基因的PCR产物配对,在延伸中产生荧光。 

PCR试剂盒器材:

1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。

2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水
处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。

PCR试剂盒使用及效果:

在无内毒素试管中,加入100 uL细菌内毒素检查用水、内毒素标准溶液,或待测样品。再加入100 uL鲎试剂溶液,混匀,37ºC温育T1分钟。温育结束,加入100 uL显色基质溶液,混匀,37ºC温育T2分钟。温育结束,加入500 uL偶氮化试剂1溶液,混匀,加入500uL偶氮化试剂2溶液,混匀加入500 uL偶氮化试剂3溶液,混匀,静置5分钟,于545nm波长处读取吸光度值。
内毒素标准范围(EU/mL)为0.01-0.1,T1为60分钟,T2为6分钟;内毒素标准范围(EU/mL)为0.1-1,T1为10分钟,T2为6分钟。

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