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近年来，因诊断和治疗方面的潜力巨大，microRNA（miRNA）研究正在快速增长，这也带动了miRNA工具和服务市场的发展。据Frost&Sullivan公司预计，到2017年，miRNA市场的规模有望突破3亿美元。miRNA虽只有短短22个核苷酸，却通过调控大量的靶基因，在基因表达中扮演了重要角色。研究发现，每个哺乳动物miRNA可能调控了约200个靶基因。到目前为止，仍有许多miRNA的功能并不清楚，原因在于已经确定的miRNA靶基因数量很少，而靶基因的预测和鉴定的难度又颇大。于是，科学家
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应用优势：■肽定量■更低的检测限和定量限■*的产物离子覆盖范围，不会发生工作周期损失■简化方法开发简介：近来，基于靶向LC/MS的方法被应用于定量蛋白组学中，以利于实现高准确度的多重相对和定量研究。在研究中，三重四极杆和高分辨率质谱仪均有使用。使用这两种仪器不是完整蛋白质直接定量，而是监测蛋白被酶解后产生的一定量的一种或多种特征肽作为替代。通常，为了进行定量需要在样品中加入特定含量的标准稳定同位素标记肽。基于三重四极杆的SRM/MRM检测的关键优势在于其灵敏度、采集速度和线性动态范围。但是，SR
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干扰素(IFN)根据其产生细胞不同和理化性质、犐z物学特性的差异可分为α干扰素(IFN-α)、β干扰素(IFN-β)和γ-干扰素(IFN-γ)。它们在机体免疫调节、抗病毒感染中具有重要作用。检测IFN的方法主要分为定量测定(常用elisa)和生物学活性的检测，后者较为常用。(一)原理干扰素能刺激某些指示细胞(如人羊膜上皮细胞Wish株、人喉癌细胞株Hep-2以及人胚肌皮或肺单层细胞)产生抗病毒蛋白，从而使细胞免受水疱性口炎病毒(VSV)的攻击，根据待测样品不同稀释度的保护能力，计算出干扰素生物学
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一、实验目的1.掌握Comori法的基本原理和方法。2.观察酸性磷酸酶在细胞内的分布状况。二、实验原理酸性磷酸酶能分解磷酸脂而释放出磷酸基，在PH5.0的环境中，磷酸基能与铅盐反应形成磷酸铅。但因其是无色的，所以再经过与硫化铵作用，形成棕黑色的硫化铅沉淀，由此就能显示酸性璃酸酶在细胞内的存在与分布。本实验的技术特点是：①用冷冻涂片和中性福尔马林固定，可避免在固定、包埋及制片过程中酶的失活，保证了实验的稳定性。②采用较短的作用时间，可避免细胞质内其它蛋白质及核内出现阳性假象，保证了实验的可靠性。③
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1)噬菌体DE3溶源化的菌株如BL21(DE3)是zui常用的表达菌株，噬菌体DE3是λ噬菌体的衍生株，构建好的表达载体可以直接转入表达菌株中，诱导蛋白的表达方式与lac启动子一样都是iptg诱导。2)表达菌株BL21(DE3)上带有lacI基因，T7RNA聚合酶编码基因以及lacUV5启动子，lacUV5启动子可以启动T7RNA聚合酶的表达;3)表达质粒如pET-28质粒带有T7启动子和编码阻遏蛋白lacI的基因，在插入目的基因后，lacI是失活的;4)在非诱导条件下，表达菌株中表达出的lac
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T细胞受体(Tcellreceptor，TCR)是T细胞表面特异性识别抗原和介导免疫应答的分子，是人类基因组中多态性zui高的区域之一，决定着人的免疫系统如何适应环境的变化。T细胞受体库的多样性(包括基因重组以及选择性表达)直接反映了机体免疫应答的状态。TCR可分为TCRα/β和TCRγ/δ两种类型,外周血T细胞主要为TCRα/β的T细胞,是介导机体特异性细胞免疫反应的主要细胞。如图1所示：TCRβ基因由可变区(V)、多变区(D)、结合区(J)和恒定区(C)四部分基因片段组成，形成互补决定区(c
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IP是利用抗原蛋白质和抗体的特异性结合以及细菌蛋白质的“proreinA”特异性地结合到免疫球蛋白的FC片段的现象活用开发出来的方法。目前多用精制的proreinA预先结合固化在argarose的beads上，使之与含有抗原的溶液及抗体反应后，beads上的proreinA就能吸附抗原达到精制的目的。首先，实验zui需要注意点就是抗体的性质。抗体不同和抗原结合能力也不同，免染能结合未必能用在IP反应。广州赛诚生物科技有限公司建议仔细检查抗体的说明书。特别是多抗的特异性是问题。其次，要注意溶解抗原
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血空斑试验(plaqueformingcellassay，PFC)是Jerne于1963年设计的用于体外检查和计数某种抗体形成细胞的一种方法。该方法是将SRBC免疫动物，随后取其脾制成淋巴细胞悬液与高浓度的SRBC混合后加入琼脂凝胶中，其中每个释放溶血性抗体的细胞可致敏其周围的SRBC，当加入补体时，致敏的SRBC被溶解而形成了局部的溶血空斑，每一个空斑代表一个抗体形成细胞。本实验采用玻片法。【材料】1.动物，小白鼠，体重18—22g。2.补体，脉鼠新鲜血清（用前须经SRBC吸收：1ml压积SR
