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实验中之显色异常

时间:2022-5-10阅读:272
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     固相载体在ELISA试剂盒测定过程中作为吸附剂和容器,不参与化学反应。可作ELISA试剂盒中载体的材料很多,聚苯乙烯具有较强的吸附蛋白质的性能,抗体或蛋白质抗原吸附其上后仍保留原来的免疫学活性,加之它的价格低廉,所以被普遍采用。

       聚苯乙烯为塑料,可制成各种形式。此时酶催化无色的底物生成有色的产物。反应的温度和时间仍是影响显色的因素。在一定时间内,阴性孔可保持无色,而阳性孔则---间的延长而呈色加强。适当提高温度有助于加速显色进行。在定量测定中,加入底物后的反应温度和时间应按规定力求准确。

      定性测定的显色可在室温进行,时间一般不需要严格控制,有时可根据阳性对照孔和阴性对照孔的显seqing况适当缩短或延长反应时间,及时判断。

技术答复可能原因如下:

(1) 水质被金属离子等污染;防止办法尽量使用新鲜水或蒸馏水。

(2) 洗涤不充分,样品中其它成分残留或酶残留;防止办法洗涤液应注满微孔,充分洗涤。

(3) 移液头重复使用,未洗净或消毒不*; 一次性使用。

(4) 酶标板灵敏度过高。

(5) 一抗显色时间的控制等等,关于ELISA试剂盒的每一步都要注意才行。


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