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精液mRNA及microRNA的物理性质

时间:2012-10-11阅读:1450
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            人体内的mRNA及microRNA (miRNA)不仅是胞内通讯的信号分子,而且很多研究已经表明,它们可以作为临床诊断的分子标记物.为了更好地加强对它们的理解和应用,迫切需要对它们的物理性质也进行深入研究.在该实验中,研究者们利用实时定量PCR技术检测了精液特异的mRNAs、miRNAs及piRNAs.虽然通过time-course分析表明,cfs-miRNA的稳定性与cfs-mRNA相似,但是对精浆采用过滤及Triton X-100处理后,cfs-miRNA及cfs-mRNA总量的变化特征却是不同的,这暗示了它们可能有不同的物理性质.
  

             随后,精液的超微小泡(SMVs)被恢复,并定量检测了SMVs中的cfs-mRNA及cfs-miRNA的含量.结果显示:SMVs内cfs-mRNAs的含量几乎与其重量一致,并且在不同大小的SMVs中高度可变.然而,大多数的cfs-miRNA却独立于SMVs存在于上层清液.之后,研究者们又通过对上层清液过滤及蛋白酶K的消化,进一步研究了cfs-miRNA.他们发现:cfs-miRNA可以通过0.10μm大小的孔,但在蛋白酶K的强烈消化后被显著降解了.这项研究表明:cfs-mRNA主要存在于SMVs内,而大部分的cfs-miRNA结合于蛋白复合体.该结果阐明了人类精液中胞外RNAs的稳定性、来源及潜在功能,为它们作为生殖系统标记物的应用研究提供了帮助.

 

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