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科瑞恩特(北京)科技有限公司
德国TansMIT公司的AP-SMALDI 5 AF高分辨自动聚焦3D快速质谱成像系统在兼具高空间分辨率和高质量分辨率的基础上,新增了3D检测模式、全像素检测模式、快速检测模式等,检测速度高达18pixels/s,检测灵敏度更是在AP-SMALDI10的基础上提升了一个数量级,该系统能够快速有效地进行生物组织样本的成像检测,将会助您探索更多的科学奥秘。
1、质谱成像技术优势:
2、TransMIT AP-SMALDI 5 AF特点:
样量之间的矛盾
3、样本类型:
4、应用领域
1、激光器
2、常压操作环境
3、细胞级空间分辨率
4、采用激光束和离子流的同轴设计,大大提高了样品表面分子离子的产率
5、成像面积:75mm × 25mm
6、采用激光器,即无害免控激光器,在使用过程中对人体无任何危险
7、配有专用于高分辨质谱成像的数据分析软件
8、搭配Thermo Scientific™ Q Exactive™ 或Orbitrap Exploris™系列质谱仪,实现高空间分辨率和高质量分辨率的结合
9、检测模式
连续模式 检测过程中载物台快速连续移动,像素点 ≤ 20μm时,取样区域为一条连续的直线。
快速模式 检测过程中载物台快速连续移动,像素点>20μm时,每个像素中取样区域长度为20μm。
全像素模式 在整个像素区域(≥ 25μm×25μm)内进行扫描,提升检测灵敏度。
三维成像 该功能能够实现在检测过程中跟踪非平面物体表面的高度变化,实现3D表面检测,如叶片、花瓣、线虫等。下图为雏菊花瓣的3D RGB MS图像。
自动聚焦 检测前激光斑点自动聚焦至样品表面,无需人工调节,节省时间,并保证样品采集完整性。
倾斜校正 能够在倾斜组织样本的图像采集过程中调整样品高度,以实现恒定的离子产率和光斑大小。
10、技术参数
研究实例一 AP-SMALDI 技术突破
德国吉森大学Bernhard Spengler教授团队通过向AP-SMALDI10离子源加入高重复频率激光器,并与Orbitrap质谱仪结合,开发了新的检测模式。该系统能够在5μm的空间分辨率和18pixels/s的成像速度下对小鼠脑组织切片进行单细胞水平可视化检测和分析。此外,在全像素检测模式下,通过在整个像素点≥25μm上进行“w”型扫描,将组织上的离子信号强度提高20倍,并将检测限降低1个数量级,提高了分析灵敏度。
图1 (a-f) “单像素模式”和 不同采集速度“快速模式”下小鼠脑连续切片MALDI MSI图像,空间分辨率40μm。红色:m/z 856.5827 [PC 40:6+Na]+,绿色:m/z 820.5253 [PC 36:4+K]+,蓝色:m/z 838.6169 [HexCer t 40:1+K]+。(g−l)是在MSI检测之前获得的对应的小鼠脑切片光学显微图像。(m−r)“单像素模式”和 不同采集速度“快速模式”下小鼠小脑区域MALDI MSI图像,空间分辨率10μm。绿色:m/z 844.5253 [PC 38:6+K]+,蓝色:m/z 832.6637 [HexCer d42:2+Na]+。(s−x) 是在MSI检测之前获得的对应的小鼠小脑区域光学显微图像。比例尺:(a−l) 2mm,(m−x) 500μm。(参考文献:Max A. Müller , et al. J. Am. Soc. Mass Spectrom. 2021, 32, 465−472)
研究实例二 3D表面质谱成像检测
近年来,MSI技术在医学、药学、生物学等领域获得了极大的关注。然而,现有质谱成像技术仅能对同一平面中的样品进行质谱成像分析,要想获得三维空间信息,则只能依靠图像的三维重建技术和数据归一化处理来实现,极为耗时。
针对3D MSI的技术瓶颈,德国吉森大学的Bernhard Spengler教授团队开发了的自动聚焦三维质谱成像技术,成果发表在国际杂志Nature Methods——Autofocusing MALDI mass spectrometry imaging of tissue sections and 3D chemical topography of nonflat surfaces(Nature Methods, 2017, 14(12): 1156)。这是继“1.4μm超高分辨率质谱成像技术”之后,Spengler教授团队的又一次突破。该技术通过把激光三角测量系统整合到AP-SMALDI10 MSI系统中,实现了小于10μm的侧向分辨率。如下图所示,自动聚焦MALDI质谱成像系统能够清晰的可视化苜蓿叶片中糖苷类和脂类物质的三维空间分布(Fig.2c),曼氏裂体吸虫中磷脂类物质空间特异性分布(Fig.2e, f),以及小鼠脑部磷脂类物质的组织空间特异性分布(Fig.2g, h)。该技术的出现可直接对三维生物样品进行质谱检测,其自动聚焦技术能够大大提升检测效率和检测通量,并有效避免样品中检测信号的缺失。
图2 苜蓿叶片、曼氏裂体吸虫和小鼠脑部自动聚焦3D质谱成像。a,苜蓿叶片光学成像图;b,总离子质谱图像;c,3D RGB质谱叠加图,[trifolin + Na]+红色、[MGDG(36:6) + K]+绿色、m/z 594.8937蓝色;d,血吸虫光学成像图;e,3D RGB质谱叠加图,[PC(36:1) + Na]+红色、[PC(34:1) + Na]+绿色、m/z 585.0636 蓝色;f,总离子质谱图像;g,小鼠脑部3D-RGB和2D-RGB质谱叠加图,[SM(d 40:2) + K]+红色、[PI-Cer(d38:0) + H]+绿色、[PC(40:7) + K]+蓝色,其中上图为自动聚焦,下图为非自动聚焦。(参考文献:Kompauer M, et al. Nature Methods, 18 Sep 2017, 14(12):1156-1158)
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