凋亡检测实验——艾美捷喜-树-碱(Camptothecin)基本操作

凋亡检测实验——艾美捷喜-树-碱(Camptothecin)基本操作

Background：

Camptothecin is a potent cytotoxic pentacyclic alkaloid known for its potent apoptosis inducing properties. Camptothecin and its analogs have been demonstrated to inhibit topoisomerase I (topo I), causing cells in S phase to enter into apoptosis. Camptothecin binds to and stabilizes the topo I – DNA backbone complex (covalent binary complex). This stabilized complex diminishes the rate of topo I release from the broken strand, thus slowing the religation and subsequent DNA synthesis process. Use camptothecin to create positive controls in apoptosis detection experiments.

Reagent Name Camptothecin

Target DNA topoisomerase I

Sample Type Cell culture

Storage -20°C

基本信息：

中文名：喜-树-碱

英文名：Camptothecin

化学名：1H-Pyrano[34:6,7]indolizino[1,2-6]puinoline-3,14(4H,12H-)-dione,4-ethy1-4-hydroxy-(s)-

分子式: C20H16N2O4

分子量： 348.34

来　源： 珙桐科植物喜树Camptotheca acuminata Decne的果实、叶。

喜-树-碱是一种植物抗癌药物，从中国中南、西南分布的喜树中提取得到。1976年中国化学家高怡生等合成消旋喜-树-碱成功。喜-树-碱对肠胃道和头颈部癌等有较好的近期疗效，但对少数病人有尿血的副作用。10-羟基喜-树-碱的抗癌活性超过喜-树-碱，对肝癌和头颈部癌也有明显疗效 ，而且副作用较少。

艾美捷喜-树-碱是一种具有抗肿瘤特性的细胞毒性植物生物碱，是一种原型DNA拓扑异构酶I抑制剂。在凋亡检测实验中使用喜-树-碱创建阳性对照。

艾美捷喜-树-碱(Camptothecin)基本操作：

1、将喜-树-碱粉末溶解在组织培养级DMSO中，以获得2mg/mL喜-树-碱储备浓度。

2、制备50–100µL的DMSO增溶喜-树-碱等分试样，并将其冷冻保存在<-20°C。一瓶冷冻的喜-树-碱可在丢弃前再解冻2次。应标记已解冻1X的小瓶，以表明这一点，以便它们在丢弃前只经过一次解冻。

3、喜-树-碱浓度范围为2–4µg/mL的刺突细胞培养物，产生6–12µM的细胞培养物喜-树-碱浓度。该喜-树-碱浓度范围适用于诱导Jurkat或HL 60细胞悬浮液，其浓度范围通常为1 x 105–1 x 106细胞/mL。在此浓度范围内，培养4小时（37°C）后成功诱导凋亡。

4、对特定细胞系进行时间历程研究，以确定合适的喜-树-碱浓度和暴露时间，从而为实验实现良好的凋亡诱导水平。

艾美捷喜-树-碱(Camptothecin)相关研究：

FAM-FLICA® Caspase-1 (YVAD) Assay Kit

Pyroptosis/Caspase-1 Assay, Green

FLICA 660 Caspase-1 Assay Kit

FAM FLICA® Caspase-1 (WEHD) Assay Kit

Magic Red® Cathepsin-B Assay Kit

Magic Red® Cathepsin L Assay Kit

FAM-FLICA®Caspase-1（YVAD）检测试剂盒

焦下垂/Caspase-1测定，绿色

FLICA 660 Caspase-1检测试剂盒

FAM FLICA®Caspase-1（WEHD）检测试剂盒

Magic Red®Cathepsin-B分析试剂盒

Magic Red®组织蛋白酶L检测试剂盒