原理和相关研究说明丨艾美捷体外活性氧/活性氮检测试剂盒

活性氧（ROS）和活性氮（RNS）是公-认的分子导致氧化应激的有害影响。与氧化应激的增加与几种疾病状态的发病机制有关。这个氧化应激在血管疾病、糖尿病、肾缺血、动脉粥样硬化、肺疾病中的作用病理状态、炎症性疾病、癌症以及衰老都已得到充分证实。自由的自由基和其他活性物质在体内不断产生，对人体造成氧化损伤生物分子，这一过程受到多种抗氧化剂和修复系统的制约，如以及替换受损的核酸、蛋白质和脂质。衡量抗氧化疗法和ROS/RNS活性对抑制或治疗氧化应激至关重要诱导剂。

艾美捷体外活性氧/活性氮检测试剂盒是一种用于测量总自由基含量的检测试剂盒一个样本。该分析使用专有的淬灭荧光探针，二氯二氢荧光素DiOxyQ（DCFH-DiOxyQ），是一种特定的ROS/RNS探针，基于与流行的2'，7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯。DCFH DiOxyQ探头首先用

然后以高反应性DCFH形式稳定反应状态下，ROS和RNS物质可以与DCFH反应，DCFH被迅速氧化成荧光2'，7'-二氯二氢荧光素（DCF）。荧光强度成比例与样品内的总ROS/RNS水平相关。DCFH DiOxyQ探针可与氢气反应过氧化物（H2O2）、过氧自由基（ROO）、一氧化氮（NO）和过氧亚硝酸根阴离子（ONO-). 这些自由基分子是ROS和RNS的代表，因此允许测量样本中的总自由基群体。

该试剂盒也可以用于评估抗氧化剂对自由基的影响。该试剂盒的检测灵敏度极限为10pMDCF和H2O2分别为40nM。每个试剂盒提供足够的试剂，最多可进行96次分析，包括标准曲线和未知样品。

艾美捷体外活性氧/活性氮检测试剂盒组分：

1. Priming Reagent (Part No. 234701): One 250 µL tube of solution.

2. Stabilization Solution (10X) (Part No. 234702): One 1.5 mL tube of solution.

3. Catalyst (250X) (Part No. 234703): One 20 µL tube of solution.

4. DCF-DiOxyQ (Part No. 234704): One 50 µL amber tube of solution in methanol.

5. DCF Standard (Part No. 234202): One 100 µL amber tube of a 1 mM solution in DMSO.

6. Hydrogen Peroxide (Part No. 234102): One 100 µL amber tube of an 8.821 M solution.

艾美捷体外活性氧/活性氮检测试剂盒检测原理：

该试剂盒是一种用于测量游离ROS/RNS总量的体外测定试剂盒自由基活性。用催化剂将未知的ROS或RNS样品或标准加入到井中这有助于加速氧化反应。短暂孵育后，制备的DCFH探针添加到所有孔中，并允许氧化反应进行。测量样品对过氧化氢或DCF标准进行荧光测定。在96孔中进行测定可以在标准荧光板读取器上读取的荧光板格式。自由基通过与预定的DCF或氢进行比较来确定未知样品中的含量过氧化物标准曲线。

相关研究：

1.STA-330：OxiSelect™ TBARS测定试剂盒（MDA定量）

2.STA-340：OxiSelect™ 超氧化物歧化酶活性测定

3.STA-341：OxiSelect™ 过氧化氢酶活性测定试剂盒

4.STA-342：OxiSelect™ 细胞内ROS测定试剂盒（绿色荧光）

相关文献：

1. Bass DA, Parce JW, Dechatelet LR, Szejda P, Seeds MC, Thomas M. Flow cytometric studies of

oxidative product formation by neutrophils: A graded response to membrane stimulation. J

Immunol. 1983; 130:1910-1917.

2. Brandt R, Keston AS. Synthesis of diacetyldichlorofluorescin: A stable reagent for fluorometric

analysis. Anal Biochem. 1965; 11:6-9.

3. Keston AS, Brandt R. The fluorometric analysis of ultramicro quantities of hydrogen peroxide.

Anal Biochem.1965; 11:1-5.