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艾美捷牛C-反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒原理

时间:2022-12-27阅读:44
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C-反应蛋白(C-Reactive ProteinCRP) 是由肝脏生成的血浆蛋白,主要被当作发炎的指标,因其对肺炎双球菌的C-多糖体(C-polysaccharide)会产生沉淀反应,故取名C-反应蛋白。C-反应蛋白由524KD原聚体(含206个氨基酸)以非共价连结成为五元体环形结构。    

 

C反应蛋白会结合在死亡细胞或微生物外膜上的磷酸胆-碱(phosphocholine),以激活补体系统。当体内有急性炎症、细菌感染、组织的损伤时,C反应蛋白在数小时内出现,而疾病治愈后又很快就消失。C反应蛋白并不适用于单一疾病的诊断。它的临床价值主要在于组织损伤的筛检和监测,应用在判断病人是否发炎以及诊断发炎性疾病复发的可能性,藉以评估抗发炎药物治疗的成效。另外C反应蛋白可用来协助类风湿性关节炎的诊断。   

 

它在肝脏中合成,在人体中通常作为血清中的痕量成分存在,水平低于0.3 mg/dL。 在急性组织损伤后血清中的水平迅速升高,并且在刺激物去除后也非常迅速地下降。已提出CRP有助于补体激活,影响吞噬细胞功能并增强细胞介导的细胞毒性。过去几年的研究已经表明,血浆或血清中CRP的定量可以提供不仅在人类中,而且在宠物和农场牲畜中的疾病的检测、预后和监测中的有价值的信息。

 

艾美捷牛C-反应蛋白(CRPELISA试剂盒预期用途:

该试剂盒是一种高度灵敏的双位点酶联免疫分析(ELISA),用于定量测定牛生物样品中的CRP。仅供研究使用。

 

艾美捷牛C-反应蛋白(CRPELISA试剂盒原理:

双抗体夹心ELISA的原理如图1所示。在该测定中样品与吸附在聚苯乙烯微量滴定孔表面的抗CRP抗体反应。通过洗涤去除未结合的蛋白质后,添加。这些酶标记的抗体与先前结合的CRP形成复合物。跟随另一个洗涤步骤,通过添加显色底物3,3'5,5'来测定与免疫吸附结合的酶-四甲基联苯胺(TMB)。结合酶的数量直接随样品中CRP的浓度而变化测试;因此,在450nm处的吸光度是测试样品中CRP浓度的量度。数量测试样品中的CRP可以从由校准品构建的校准曲线中插值,并根据样品稀释。

 

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艾美捷牛C-反应蛋白(CRPELISA试剂盒组件:

1.浓缩稀释剂

一瓶含有50mL 5X浓缩稀释液流动缓冲液。

2.浓缩洗涤液

一瓶含有50mL 20X浓缩洗涤液。

3.酶抗体结合物浓缩物

一个含有150µL 100X浓缩亲和纯化的抗牛CRP抗体的小瓶

稳定缓冲液。

4.TMB基板溶液

一瓶含有12mL TMB和过氧化氢的柠檬酸缓冲液(pH 3.3)。

5.微量滴定板

12个可拆卸的8个井条,位于井支架框架内。孔用亲和纯化的抗牛CRP包被。

6.CRP校准器

一个装有冻干牛CRP校准品的小瓶。

 

性能特性:

根据良好的实验室实践,特定CRP的测定需要严格的质量控制。每个实验室应使用常规质量控制程序来确定批间和批内精密度和性能特征。

程序的限制

1.当用完整的分析程序进行分析时,将获得可靠和可重复的结果了解包装说明书中包含的信息,并遵守良好的实验室实践

2.可能影响测定性能的因素包括适当的仪器功能、玻璃器皿的清洁度、蒸馏水或去离子水的质量、试剂和样品移液管的准确度、清洗技术、培养时间或温度。

 

除此之外,Kamiya还有各种不同种属的C-反应蛋白(CRPELISA试剂盒。


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