辛基-琼脂糖凝胶 CL-4B操作步骤和注意事项

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辛基-琼脂糖凝胶 CL-4B参数说明

中文名：辛基-琼脂糖凝胶 CL-4B

英文名：octyl -Sepharose CL-4B

供应商：上海远慕

凝胶类型：疏水层析填料

粒径： 45-165μm

工作PH值：3-12

操作温度：4-40℃

结构成分：4%交联琼脂糖

包装：25毫升/瓶，100毫升/瓶，大包装

配基偶联量：40μmol phenyl/ml 凝胶

保存条件：4℃

性状：白色微球，凝胶状，保存在20%酒精溶液中

应用：疏水层析介质，适合含芳香族配体蛋白纯化，特别适合单抗的纯化等。

辛基-琼脂糖凝胶 H.P.说明

辛基-琼脂糖凝胶 CL-4B操作步骤

1.乙醇浸泡：在室温下，将干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小时，并不断搅拌以保证凝胶溶胀，用无盐水洗去残存的乙醇滤干;

2.无盐水浸泡：室温下，在无盐水中充分溶胀24小时，间隙搅拌，以保证凝胶的*溶胀，然后;

3.盐酸浸泡：在常温下再用0.2NHCl浸泡12小时，间隙搅拌，滤干，水洗只中性;

4.将溶胀好的凝胶脱气后(真空抽滤或超声波)根据装柱要求一次性置入柱内，注意保持湿态装柱，并避免柱内产生气泡或断层;

5.上样前平衡层析柱至少3-5个柱体积直到记录仪基线变得平稳为止(流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值);

6.凝胶过滤的上样量一般为5%的柱床体积，我们建议初次上样控制在1-2%的床体积，视分离情况可以调整;脱盐时上样量可以达到20%的柱床体积，柱高的选择也与分离要求相关，柱高控制在40-50cm以下，过高的凝胶层会引起较大的反压，应当尽可能避免。难分离物质要有一定柱高和流速控制，脱盐时高径比为5：1即可;

7.洗脱方法：可以用无盐水，也可以采用上柱时的缓冲液洗脱;在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脱或盐梯度洗脱也可以*分离纯化;

8.在位清洗(CIP)凝胶使用十次后作一次CIP，目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氢氧化钠反向洗四个柱体积，再以至少三个柱体积平衡缓冲液再生。

辛基-琼脂糖凝胶 CL-4B操作注意事项

1、密封贮存于4°C-28°C(保存溶液为20%乙醇)，通风、干燥的地方，不能冷冻;用过的柱子贮存于4°C(20%乙醇)。

2、在装柱、使用和保存柱子的时候，要避免柱子流干，气泡进入。

3、在实验过程中，请严格遵循产品说明书上的要求进行操作。

4、本产品避免与氧化剂接触;避免长时间暴露在空气中。

5、保质期：5年。

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