NCTC 1469（小鼠正常肝细胞）实验方法

细胞名称：NCTC 1469（小鼠正常肝细胞）实验方法

细胞形态

圆形

背景描述

NCTC 1469细胞是于1952年建系，源于正常C3H/An小鼠的肝脏组织；NCTC 1469细胞可表达H-2K抗原，鼠痘病毒阴性。

生长培养基

DMEM高糖(货号:PM150210)＋10% HS(货号:164215-100)＋1% P/S(货号:PB180120)

培养条件

气相：空气，95%；CO2，5%

温度：37℃

优势：
1、细胞株种类齐全，包括肿瘤细胞、正常细胞、耐药细胞株，如：人滑膜细胞，人胃癌细胞，人细胞，人肾近曲小管上皮细胞，肝癌细胞，心肌细胞，子宫内膜细胞等
2、*，专业的细胞培养技术指导
3、购买本公司的细胞株，免费复苏
4、客户收到细胞后一天回传细胞图片，三天回传细胞生长状态图片，五天内有问题公司负责重发，超过五天时限至一个月内重发细胞收半价，超过一个月重发全额收费。
5、经济、实惠、可靠，完善、稳定的实验体系，优秀的科研队伍，*的实验设备、准确可靠的实验结果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我们还可以提供Elisa试剂盒、细胞株、抗体、血清、培养基、常用生化试剂、耗材。
操作步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽*储存。
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
钙/钙调素依赖蛋白激酶1β/CaMKIβ抗体 PNCK
丙酮酸激酶-M2抗体 PKM2
原钙粘蛋白β7抗体 PCDHB7
*型纤溶酶原激活因子受体抗体 uPA Receptor
配对盒基因5抗体 PAX5
PEG3蛋白抗体 PEG3
泛素连接酶抗体 PIRH2
帕金蛋白抗体 Parkin
程序性死亡1抗体 PD-1
过氧化还原酶3抗体 PRDX3
前列腺酸性磷酸酶抗体 PSAP
蛋白激酶AKT底物1抗体 PRAS40
p21激活激酶1抗体 PAK1
庚型肝炎病毒多聚蛋白抗体 HGV Polyprotein
内脂素/内脏脂肪素/前B细胞克隆增强因子1抗体 PBEF1
胰岛素原抗体 Proinsulin
平足蛋白gp36/淋巴管内皮细胞蛋白抗体 Podoplanin Protein
核苷酸内焦磷酸酶/磷酸二酯酶1抗体 ENPP1
胰腺特异转录因子PTF1A抗体 PTF1A
蛋白*磷酸酶PTPσ抗体 PTPRS
ETS结构域转录因子FEV抗体 Pet1
神经丛蛋白A3抗体 Plexin A3
磷酸化蛋白*磷酸酶1C抗体 phospho-PTPN6(Tyr564)
*/*蛋白磷酸酶4C抗体 PPP4C
神经元PAS结构域蛋白5抗体 PASD5
蛋白*磷酸酶受体PCPTP1抗体 PCPTP1
植烷酰*羟化酶2相互作用蛋白抗体 PHYHIP
旁瘤抗原MA1抗体 PNMA1
大脑蛋白1抗体 POU3F3
核糖核酸结合蛋白2抗体 PTBP2
磷酸化过氧化酶活化增生受体γ抗体 PPARγ Phospho-PPAR Gamma (ser273)
早老素蛋白1+2抗体 Presenilin 1 + 2
猪蓝耳病病毒抗体 PRRSV
DR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5)  肿瘤细胞调亡素/死亡受体5抗原 石英96孔板  0.5mg
DP-I/DSP(desmoplakin I )  桥粒斑蛋白1抗原  10毫升玻璃匀浆器  0.5mg
DVL1 (dishevelled 1)  蓬乱蛋白1 20毫升玻璃匀浆器  0.5mg
Dynamin 2(Ai-Human Dynamin-2 )  鸟苷三磷酸酶－发动蛋白2抗体 50毫升玻璃匀浆器  0.5mg
Nadrin peptide  发育调节蛋白多肽抗原 多聚赖氨酸载玻片  0.5mg
E2F1  转录因子E2F-1 明胶载玻片  0.5mg
E2F2  转录因子E2F-2抗原 Wescodyne实验室消毒剂  0.5mg
E2F4  转录因子E2F-4抗原 PUREBRANE护手露  0.5mg
E2F6  转录因子E2F-6抗原 CLEAR & PURE洁手露  0.5mg
E2 tag  E2 tag多肽抗原 鞋底清洁剂  0.5mg
EAAT3(Excitatory amino acid transporters 3)  胶质细胞*运载蛋白3抗原 屏幕清洁剂（电视、电脑等）  0.5mg
EBNA-3 (EpsteinBarr nuclear Ai-gens 3)  EB病毒编码核蛋白-3(抗原) 玻璃清洁剂（橱窗、大门、汽车玻璃等）  0.5mg
ECE1(Endothelin Converting Enzyme 1)  内皮素转化酶1抗原 空调清洁剂  0.5mg
ECE2(Endothelin Converting Enzyme 2)  内皮素转化酶2抗原 台桌清洁剂（饭桌、工作台、学生课桌椅等）  0.5mg
ECP(eosinophil cationic protein)mouse rat  嗜酸性粒细胞阳离子蛋白抗原 鸟苷酸酶总活性比色法定量检测试剂盒    0.5mg
ED-1 (Ectodermal Dysplasia 1)  外胚层发育不良抗原 Arf1鸟苷酸酶活性分析试剂盒  0.5mg
rhEGF(rh-Epidermal growth factor)  * Arf6鸟苷酸酶活性分析试剂盒  100ug
EGF(Epidermal growth factor)rat  重组表皮生长因子抗原(大鼠) Cdc42鸟苷酸酶活性分析试剂盒  0.5mg