NIH/3T3细胞传代细胞,活性好、存活率高、质量保证,生长状态良好,没有细菌 真菌 支原体等微生物污染。NIH/3T3细胞一般以T25培养瓶包装,容积75ml细胞数量可达10的6次方左右。
细胞名称:小鼠胚胎成纤维细胞;NIH/3T3
物种:小鼠
规格:T25培养瓶,1×106cells
形态特征:成纤维细胞样
生长特性:贴壁
培养条件: DMEM-H 10%FBS
传代方法: 1:3-1:6传代。当细胞生长至80%或80%以下汇合时即可传代,切勿达到汇合;每周2次。
NIH/3T3细胞复苏时如何换液呢?
1冻存细胞取出后37℃速溶,取15ml离心管,加入10ml含血清培养基,将冻存管中液体(通常1.5ml)也加入离心管中,习惯轻吹几下混匀,1200转常温离心5min,去掉上清,加入5ml含血清培养基,轻吹制成细胞悬液,加入到培养瓶中,即可。
注意,新复苏的NIH/3T3细胞不要经常去看去动。
换液的话,只要把培养基吸出,再加入新的培养基就可以了
如果你复苏的细胞长得很不均匀,可以*消化下来再混匀后在重新加进去(像正常细胞一样做)。
两种方案可供选择:
一、复苏时,行离心,弃上清后,种入瓶中。主要目的是防止DMSO对细胞造成损害,但刚复苏的细胞教脆弱,离心易导致细胞破碎。
二、NIH/3T3细胞复苏时,直接将冻存管里的液体倒入培养瓶中,另外添加适量的培养基,孵箱24h,待贴壁后行常规换液。省去了离心一步,避免离心时细胞破裂。但DMSO未能去除,长时间培养可能会对细胞有损害。个人觉得第二种方案较方便。
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