【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
| 产品名称 | 抗T淋巴细胞单克隆抗体杂交瘤细胞；CD3使用说明书 |
| 货期 | 3－5天 |
| 发货地 | 上海 |
细胞名称 抗T淋巴细胞单克隆抗体杂交瘤细胞；CD3使用说明书
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 该细胞属保藏，其特征特性尚未公开。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代，3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
复苏操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过zui易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合
操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
MAPK1/ERK3 (Mitogen-activated protein kinase 3; P44MAPK) 丝裂原活化蛋白激酶3抗原
MAPK4(Mitogen-activated protein kinase 4) 丝裂原活化蛋白激酶4抗原
ER- Alpha(phospho-Ser167)peptide 人磷酸化雌激素受体α多肽抗原
ER- Alpha(phospho-Tyr537)peptide 磷酸化雌激素受体α抗原
ER- Alpha /ER alpha peptide 雌激素受体α抗原
ER- Alpha/ER alpha peptide 雌激素受体α抗原
ER- Beta (Estrogen receptor-beta) peptide 雌激素受体β抗原
ets1/E26 (E-twenty six 1) Ets转录因子家族ets1抗原
EV71(Human enterovirus 71)VP1(CT) 肠道病毒71型/手足口病病毒抗原(C端)地榆Sanguisorba officinalis 3-O-p-Coumaroyloleanolic acid 3-O-对香豆酰* 151334-06-4 C39H54O5 ≥95%
金露花Duranta repens 3-O-trans-p-Coumaroyltormentic acid 3-O-反式对香豆酰委陵菜酸 121064-78-6 C39H54O7 ≥97%
南美蟛蜞菊Wedelia trilobata 3α-Cinnamoyloxypterokaurene L3 3ALPHA-肉桂酰氧基-9BETA-羟基-等效-贝壳杉-16-烯-19-酸 79406-13-6 C29H36O5 ≥95%
紫茎泽兰Eupatorium adenophorum 4-Cadinen-7-ol 4-杜松萜烯-7-醇 217650-27-6 C15H26O ≥95%
割舌树Walsura robusta Cabraleadiol 南美楝属二醇 67253-01-4 C30H52O3 ≥99%
浆果楝Cipadessa baccifera Cabraleadiol 3-acetate 3-乙酸南美楝属二醇酯 35833-62-6 C32H54O4 ≥95%
割舌树Walsura robusta Cabraleahydroxylactone 3-表南美楝羟基内酯 35833-69-3 C27H44O3 ≥95%
山楝Aphanamixis polystachya Cabralealactone none 19865-87-3 C27H42O3 ≥95%
