【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 小鼠纤维肉瘤细胞；WEHI 164使用说明书
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞系源自3-甲基胆蒽诱导产生的BALB/c小鼠纤维肉瘤，由M. Rollinghoff and N.L. Warneri建立。该细胞鼠痘病毒阴性。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C170
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶 同工酶鉴定
染色体
使用权限 A类
| 产品名称 | 小鼠纤维肉瘤细胞；WEHI 164使用说明书 |
| 货期 | 3－5天 |
| 发货地 | 上海 |
复苏操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过zui易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合
操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
Lysyl tRNA synthetase 赖氨酸tRNA的连接酶抗体
Kidins220 220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗体
phospho-Kidins220 (Ser918) 磷酸化220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗体
KRV-VP1 + KRV-VP2 (C-terminus) 基尔曼氏细小病毒VP1/VP2抗体(大鼠潜在病毒KRV)C端
KCNQ1 钾离子通道蛋白家族KCNQ1抗体
KMT1A 组蛋白H3 K9甲基转移酶抗体
KAT13D 生物钟KAT13D蛋白抗体
KLHL36 Kelch样蛋白36抗体
KCC4 钾氯离子转运蛋白KCC4抗体
phospho-KCNA3(Tyr135) 磷酸化离子通道蛋白Kv1.3抗体
KCNE4 钾离子通道蛋白家族成员4抗体
KCNF1 电压门控钾通道蛋白亚基kv5.1抗体
KCNG1 电压门控钾通道蛋白亚基kv6.1抗体五味子乙素 Schizandrin B 61281-37-6 400.46 C23H28O6
五味子醇甲 schizandrin 7432-28-2 432.51 C24H32O7
五味子甲素 deoxyschizandrin 61281-38-7 416.51 C24H32O6
五味子酯乙 Schizantherin B 58546-55-7 514.56416 C28H34O9
五味子醇乙 Gomisin A 58546-54-6 416.46 C23H28O7
梭砂贝母酮碱;新贝甲素
西贝母碱;西贝素;西贝碱 IMPERIALINE 61825-98-7 429.64 C27H43NO3
西贝母碱苷
酪醇 4-Hydroxyphenethyl alcohol 501-94-0 138.16 C8H10O2
去氢钩藤碱 Spiro[3H-indole-3,1'(5'H)-indolizine]-7'-aceticacid, 6'-ethenyl-1,2,2',3',6',7',8',8'a-octahydro-a-(methoxymethylene)-2-oxo-, methyl ester, (aE,1'R,6'R,7'S,8'aS)- 630-94-4 382.45284 C22H26N2O4
光萼野百合碱;光萼猪屎豆碱;乌沙拉明 [1,6]Dioxacyclododecino[2,3,4-gh]pyrrolizine-2,7-dione,3-ethylidene-3,4,5,6,9,11,13,14,14a,14b-decahydro-6-hydroxy-6-(hydroxymethyl)-5-methyl-,(3E,5R,6S,14aR,14bR)- 15503-87-4 351.3942 C18H25NO6
异去氢钩藤碱 Isocorynoxeine 51014-29-0 382.45284 C22H26N2O4
哈巴苷 [1S-(1α,4aα,5α,7α,7aα)]-1,4a,5,6,7,7a-hexahydro-4a,5,7-trihydroxy-7-methylcyclopenta[c]pyran-1-yl β-D-glucopyranoside 6926/8/5 364.34506 C15H24O10
