【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
产品名称 | 小鼠成纤维细胞;NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]培养 |
货期 | 3-5天 |
发货地 | 上海 |
细胞名称 小鼠成纤维细胞;NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]培养
形态特性 成纤维细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性 1948年三月建立了NCTC clone 929(小鼠结缔组织),细胞系L的克隆。细胞系L是zui早建立的连续培养细胞系之一,而clone 929是zui早的克隆株。 从一只100日龄的雄性C3H/An小鼠的正常皮下疏松结缔组织入脂肪组织中建立了亲本细胞系L。 第95代的细胞系L使用毛细管法分离单细胞建立了clone929。 检测发现鼠痘病毒阴性。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 马血清,10%
传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 P(560+5)
冻存条件 *培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
小鼠成纤维细胞;NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]培养复苏操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过zui易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
小鼠成纤维细胞;NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]培养操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
产气荚膜梭菌显色培养基 1000ml/瓶 产气荚膜梭菌显色培养基
*显色培养基 1000ml/瓶 *显色培养基
志贺氏菌显色培养基 1000ml/瓶 志贺氏菌显色培养基
肠球菌显色培养基 1000ml/瓶 肠球菌显色培养基
TBX显色培养基 1000ml/瓶 用于大肠杆菌快速检测,24h内出结果,大肠杆菌显蓝色
霉菌和酵母菌显色培养基 1000ml/瓶 霉菌和酵母菌显色培养基
改良LMX肉汤 2万ml/瓶 用于同时快速检测大肠杆菌、大肠菌群,24h内出结果
大肠杆菌/大肠菌群液体显色培养基 2万ml/瓶 用于同时快速检测大肠杆菌、大肠菌群,24h内出结果,大肠杆菌有蓝色荧光,大肠菌群呈蓝色
大肠杆菌/大肠菌群液体显色培养基 1000ml/瓶 用于同时快速检测大肠杆菌、大肠菌群,24h内出结果,大肠杆菌有蓝色荧光,大肠菌群呈蓝色
细菌总数显色培养基 2000ml/瓶 用于细菌总数测定,24h内出结果,细菌呈红色
细菌总数显色培养基 1万ml/瓶 用于细菌总数测定,24h内出结果,细菌呈红色
TBX显色培养基 5000ml/瓶 用于大肠杆菌快速检测,24h内出结果,大肠杆菌显蓝色
大肠杆菌/大肠菌群显色培养基 1000ml/瓶 用于同时快速检测大肠杆菌、大肠菌群,24h内出结果,大肠杆菌蓝紫色,大肠菌群橙红色
大肠菌群显色培养基 1000ml/瓶 用于大肠菌群快速检测,24h内出结果,大肠菌群显蓝色
培养基配套试剂 HCG alpha(4A8) 人绒毛膜促腺激素α 亚基单抗
HBsAg(H2F4) 人乙型肝炎表面抗原单克隆抗体(检测)
HBeAg (2E9) 人乙型肝炎e抗原单克隆(包被)抗体
HBeAg(2E6) 人乙型肝炎e抗原单克隆(检测)抗体
hHb(H5A3) 小鼠抗人血红蛋白单克隆抗体
H1N1 Hemagglutinin 1 甲型流感病毒血凝素抗体
小鼠成纤维细胞;NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]培养Phospho-HER2(Tyr1112) 磷酸化HER2受体抗体
HDAC4 组蛋白去乙酰化酶4抗体
Phospho-HER2 (Tyr1221 + Tyr1222) 磷酸化HER2受体抗体
phospho-HDAC8 (Ser39) 磷酸化组蛋白去乙酰化酶8抗体