小鼠NP-Yelisa试剂盒的敏感性:
在测定血清中某一物质的含量时,化学比色法的敏感度为mg/ml水平,酶反应测定法的敏感度约为5~10μg/ml,免疫测定中凝胶扩散法和浊度法的敏感度与酶反应法相仿。标记的免疫测定的敏感度可提高数千倍,达ng/ml水平。例如,用放射免疫测定法或酶免疫测定法测定HBsAg,其敏感度可达0.1ng/ml。
小鼠NP-Yelisa试剂盒的温育操作:
ELISA试剂盒中一般有两次抗原抗体反应,即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间,这一保温过程称为温育(incubation)。
ELISA试剂盒属固相免疫测定,抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例,加入板孔中的标本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会,只有zui贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐步平衡的过程,因此需经扩散才能达到反应的终点。在其后加入的酶标记抗体与固相抗原的结合也同样如此。这就是为什么ELISA反应总是需要一定时间的温育。温育常采用的温度有 43℃、37℃、室温和4℃(冰箱温度)等。
的免疫测定在检验中的应用:
由于各种抗原成份,包括小分子的半抗原,均可用以制备特异性的抗血清或单克隆抗体,利用此抗体作为试剂就可检测标本中相应的抗原,因此免疫测定的应用范围极广,在检验中可用于测定:
1)体液中的各种蛋白质,包括含量极少的蛋白质如甲胎蛋白等。
2)激素,包括小分子量的甾体激素等。
3)抗生素和药物。
4)病原体抗原,HBsAg、HBeAg等。
5)另外,也可利用纯化的抗原检测标本中的抗体,例如抗-HBs等。
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