移动端

人ELISA试剂盒的解决办法

2015年08月31日 08:51上海科兴商贸有限公司点击量:504

    血清是zui常用的人ELISA试剂盒标本,血浆一般可视为与血清同等的标本,标本引起的假阳性和假阴性结果主要是干扰性物质所致,分为内源性物质和外源性物质两种,本文主要为大家介绍内源性物质:
    内源性物质: 有人认为大约40%人血清标本中含有非特异性干扰物质,可以不同程度影响检测结果。常见的干扰物质有:类风湿因子、补体、嗜异性抗体、嗜靶抗原自身抗体、医源性诱导的抗鼠Ig (s)抗体、交叉反应物质和其它物质等。
    (1)类风湿因子
    人血清中IgMIgG型类风湿因子(RF)可以与人ELISA试剂盒系统中的捕获抗体及酶标记二抗的FC段直接结合,从而导致假阳性。
解决该情况的办法是:
①用F(ab)2替代完整的IgG
②标本用联有热变性(63℃,10 minIgG的固相吸附剂处理(将热变性IgG加入到标本稀释液中同样有效);③检测抗原时,可以用2-巯基乙醇等加入到标本稀释液中,使RF降解。
    (2)补体 ELISA系统中固相一抗和标记二抗过程中,人ELISA试剂盒抗体分子发生变构,其FC段的补体C1q分子结合位点被暴露出来,使C1q 可以将二者连接起来,人ELISA试剂盒从而造成假阳性。解决的办法是:①用EDTA稀释标本;②用53℃,10 min56℃,30 min加热血清使C1q灭活。
    (3)嗜异性抗体 人类血清中含有能与啮齿类动物(如鼠等)Ig (s) 结合的天然嗜异性抗体,可将ELISA系统中一抗和二抗连接起来,也能造成假阳性。解决的办法是:可在标本稀释液中加入过量的动物Ig (s) ,但加入量不足或亚类不同时无效。
    (4)嗜靶抗原的自身抗体 抗甲状腺球蛋白、抗胰岛素等嗜靶抗原的自身抗体,有时能与靶抗原结合形成复合物,在人ELISA试剂盒方法中均可干扰抗原抗体测定结果。为避免以上情况出现,测定前需用理化方法将其解离后再测定。


版权与免责声明: 凡本网注明“来源:智慧城市网”的所有作品,均为浙江兴旺宝明通网络有限公司-智慧城市网合法拥有版权或有权使用的作品,未经本网授权不得转载、摘编或利用其它方式使用上述作品。已经本网授权使用作品的,应在授权范围内使用,并注明“来源:智慧城市网www.afzhan.com”。违反上述声明者,本网将追究其相关法律责任。

本网转载并注明自其它来源(非智慧城市网www.afzhan.com)的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点或和对其真实性负责,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品第一来源,并自负版权等法律责任。

编辑精选

更多

本站精选

更多

视频直击

更多

专题推荐

更多

名企推荐

更多

浙公网安备 33010602000006号