基础底层培养基(Ames 试验)
绝大多数培养基是建立在*(BSS)基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。zui广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和代谢添加剂(例如核苷酸)。MEM/F12 这两种培养基各取1/2,形成神经生物学zui通用的培养基。Dulbecco`s改良培养基——DMEM,现应用于快速生长的细胞,同MEM含有相同的营养成分,但浓度高出2~4倍。选择某种培养基,应仔细了解成分表,应知道大多数情形下培养基都有不足。例如,有些培养基在氨基酸中包括有*,而这种培养基虽广泛用于神经生物学领域,但它对某些对*敏感的可能有细胞外毒性损伤的神经元而言,则并非*选择,特别是如果神经元生长在缺乏胶质的环境中时。F12中含有*,据报道也有神经毒效应。
底层培养基(Ames 试验) 制备方法:
1. 培养同源细胞(未克隆前时的同一细胞)至半汇合状态时,更换一次培养液,再继续培养24~48小时后,吸出所有培养液。
2. 离心:3000~4000/分离心10分钟,吸取上清液。
3. 滤过:再经直径0.22μm滤孔的滤膜过滤,低温冻存贮备用;用时取1分适应培养基+2培养基混合使用。
生长因子绝大多数哺乳类胚胎神经元有严格的营养要求,若不能提供适宜的生长因子或合适的因子组分,将会使绝大多数神经元在体外培养的数天中死亡。解决这一问题有两条思路,一是让培养细胞提供自己的营养因子,二是在底层培养基(Ames 试验) 中加入纯的生长因子。如果细胞混合物能在高密度时生长,所需的生长因子便会积累到可观的数值,尤其当培养基很少变化时。若某种细胞混合物生长时有很少的营养需求,可保持培养基在一段时间里不作任何变动,以使营养(生长)因子积累,而zui后促使所需要的细胞类型能够生长。但是,这种对营养(生长)因子自身倚赖性亦有弊端,因为通常在混合细胞群体中细胞很难有同比例增殖,某些细胞会因生长条件的贫乏而受限制。另外,这种方法只能进行相当高密度的细胞培养。因为培养基的条件在细胞的较低密度时变的不够有效。不过某些时候纯化神经元群体的低密度培养可用条件培养基(经过了高密度培养)进行,或在胶质上生长的神经元所用过的培养基来支持。
满足神经元营养需求的第二条途径是向培养基中加入生长因子。通常用于组培的通用适宜因子是神经生长因子NGF。不过,只有少数对这种蛋白质有反应的细胞类型的细胞才能生长。
底层培养基(Ames 试验) 相关产品如下:hz0351 鼠逆转录酶病毒包装细胞,PT67细胞
hz0353 鼠肌原细胞,C2C12细胞
hz0354 鼠黑色素瘤细胞系 B16-Fo细胞
hz0355 鼠骨髓瘤细胞,SP2/0-Ag14细胞
hz0356 鼠骨髓瘤 J558L细胞,
hz0357 鼠肝星形细胞,HSC-T6细胞
hz0358 鼠肝癌细胞系 MM45T.Li细胞
hz0359 鼠肝癌细胞,H22-H8D8细胞
hz0360 鼠腹水瘤 EAC-E2G8细胞
hz0361 鼠腹水单核细胞瘤 J774A.1细胞
hz0362 鼠成纤维细胞系 GR细胞
hz0373 食管癌细胞,TE-1细胞
hz0374 食管癌细胞,Eca-109细胞
hz0378 肾小球足细胞,mouse podocyte细胞
hz0379 肾透明细胞腺癌细胞,786-O [786-0]细胞
hz0380 肾上腺嗜铬细胞瘤细胞,PC-12细胞
hz0381 肾上腺嗜铬细胞瘤 PC12细胞
hz0382 肾上腺神经母细胞瘤细胞(脑转移) KP-N-NS细胞
hz0383 肾上腺皮质腺癌细胞,SW-13细胞
hz0384 肾上腺皮质细胞,Y1细胞
hz0385 肾癌细胞,OS-RC-2细胞
hz0386 神经上皮瘤细胞,SK-N-MC细胞
hz0387 神经母细胞瘤细胞,SK-N-SH细胞
hz0388 神经母细胞瘤细胞,SH-SY5Y细胞
hz0389 神经胶质瘤细胞, SHG-44细胞
hz0390 神经胶质瘤细胞, CRT细胞
hz0392 上颌牙龈癌颈淋巴结转移癌 GNM细胞
hz0399 乳腺肿瘤细胞,C127细胞
hz0400 乳腺腺癌细胞,SK-BR-3细胞
hz0401 乳腺细胞,Hs 578Bs细胞
hz0402 乳腺管癌细胞,T-47D细胞
hz0403 乳腺管癌细胞,BT549细胞


















