基础抗生素培养基32 号
绝大多数培养基是建立在*(BSS)基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。zui广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和代谢添加剂(例如核苷酸)。MEM/F12 这两种培养基各取1/2,形成神经生物学zui通用的培养基。Dulbecco`s改良培养基——DMEM,现应用于快速生长的细胞,同MEM含有相同的营养成分,但浓度高出2~4倍。选择某种培养基,应仔细了解成分表,应知道大多数情形下培养基都有不足。例如,有些培养基在氨基酸中包括有*,而这种培养基虽广泛用于神经生物学领域,但它对某些对*敏感的可能有细胞外毒性损伤的神经元而言,则并非*选择,特别是如果神经元生长在缺乏胶质的环境中时。F12中含有*,据报道也有神经毒效应。
抗生素培养基32 号制备方法:
1. 培养同源细胞(未克隆前时的同一细胞)至半汇合状态时,更换一次培养液,再继续培养24~48小时后,吸出所有培养液。
2. 离心:3000~4000/分离心10分钟,吸取上清液。
3. 滤过:再经直径0.22μm滤孔的滤膜过滤,低温冻存贮备用;用时取1分适应培养基+2培养基混合使用。
生长因子绝大多数哺乳类胚胎神经元有严格的营养要求,若不能提供适宜的生长因子或合适的因子组分,将会使绝大多数神经元在体外培养的数天中死亡。解决这一问题有两条思路,一是让培养细胞提供自己的营养因子,二是在抗生素培养基32 号中加入纯的生长因子。如果细胞混合物能在高密度时生长,所需的生长因子便会积累到可观的数值,尤其当培养基很少变化时。若某种细胞混合物生长时有很少的营养需求,可保持培养基在一段时间里不作任何变动,以使营养(生长)因子积累,而zui后促使所需要的细胞类型能够生长。但是,这种对营养(生长)因子自身倚赖性亦有弊端,因为通常在混合细胞群体中细胞很难有同比例增殖,某些细胞会因生长条件的贫乏而受限制。另外,这种方法只能进行相当高密度的细胞培养。因为培养基的条件在细胞的较低密度时变的不够有效。不过某些时候纯化神经元群体的低密度培养可用条件培养基(经过了高密度培养)进行,或在胶质上生长的神经元所用过的培养基来支持。
满足神经元营养需求的第二条途径是向培养基中加入生长因子。通常用于组培的通用适宜因子是神经生长因子NGF。不过,只有少数对这种蛋白质有反应的细胞类型的细胞才能生长。
抗生素培养基32 号相关产品如下:hz1744 LLC小鼠 Lewis 肺癌细胞,Lewis细胞
hz1745 Leuwis肺癌细胞,LLC细胞
hz1750 K562耐*细胞株 K562/ADP细胞
hz1751 HPVl6 E6、E7和ras基因共转化的C57BL/C(H-2b)小鼠肺上皮细胞,TC-1细胞
hz1752 HEK293,人胚肾上皮细胞,293A细胞
hz1753 EB病毒转化的绒猴淋巴细胞,B95-8细胞
hz1754 EBV 转化的绒猴白细胞,B95-8细胞
hz1755 EB 病毒转化的B 细胞,CGM1细胞
hz1756 CCL13张氏肝细胞正常 Chang liver细胞
hz1759 B淋巴细胞, WEHI 22.1细胞
hz1760 Burkitt's 淋巴瘤细胞,Raji细胞
hz1761 Burkitt's 淋巴瘤细胞,NAMALWA细胞
hz1762 BALB/C小鼠胚成纤维细胞,BALB/3T3细胞
hz1763 BALB/C小鼠肝上皮细胞,BNL1ME A.7R.1细胞
hz1764 BALB/c小鼠ES细胞,B/c-ES细胞
hz1765 Asp2人胚胎肾细胞转化细胞,FC33细胞
hz1766 Ad5DNA转化的胚肾 HEK-293细胞
hz1776 5-8转基因鼻咽癌细胞系 F2-2细胞
hz1777 293T/17人胚肾细胞,293T/17细胞
hz1778 1肝细胞
hz1779 129小鼠ES细胞,E14细胞
hz1780 129小鼠ES细胞,D3细胞
hz1781 (舌鳞癌细胞,Tca-8113细胞
hz1782 (卵巢癌细胞,HO-8910细胞
hz1783 (急性粒细胞白血病细胞) HL-60细胞
hz1784 (肝癌细胞,SK-HEP-1细胞
hz1785 (膀胱鳞癌细胞,SCaBER细胞
hz1786 ( 胚肾细胞,) AAV-293细胞
hz1787 转化的非洲绿猴肾细胞,COS-7(SV40细胞
hz1788 中国仓鼠卵巢细胞,CHO细胞
hz1789 乳腺管癌 T47-D细胞
hz1790 人正常皮肤细胞,Hacat细胞
hz1791 人胃腺癌细胞(低分化) Human BGC-823细胞


















