胆汁酸盐输出泵蛋白抗体(antibody,Ab)是机体免疫系统受到抗原刺激后产生的特异性球蛋白,称免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。根据其重链稳定区的分子结构和抗原性的不同,可将为类Ig分为IgG、IgA、IgM、IgD和IgE等五大类。由遗传基因决定所产生的抗体,称天然抗体(natural antibody),由抗原激发免疫细胞产生的抗体,称免疫抗体(immune antibody)或称特异地性抗体。人工制备的特异性抗体又可分为多克隆抗体、单克隆抗体和基因工程抗体三种类型。
检测病原体常用的胆汁酸盐输出泵蛋白抗体有人工制备的特异性多克隆抗体、单克隆抗体和基因工程抗体三种类型。
操作步骤:
1取适量Protein A+G Beads悬液,装入层析柱,用10倍柱体积的PBS(或者TBS,下同)洗涤平衡层析柱。
2含抗体的血清或其它体液高速离心后,将上清与等体积2×PBS缓冲液混合,调整pH以及离子浓度后(确认pH值为7±0.5),缓慢加入层析柱。
3用10倍柱体积以上的PBS洗涤,至流出液无蛋白检出。
4加入2倍柱体积0.1 M 柠檬酸(Citrate Acid, pH 2.7)封闭流出管,静置5分钟后收集穿出液,重复三次。测定 OD280估算抗体浓度,如果所得抗体较多可以使用SDS-PAGE检测纯度。也可以选择0.1 M*(Glycine, pH 3.0)洗脱。
5洗脱后的抗体立即加入2/5体积的1 M Tris,pH 9.0中和,使用Millipore蛋白浓缩管切换到所需缓冲液,或者透析,缓冲液通常为PBS含有0.02% NaN3以及1 mM EDTA。
6浓缩到所需体积,加入50%甘油;测定效价后,分装并保存在-20℃,避免冻结。
相关产品如下:hz-9773R C10orf63/Enkurin 10号染色体开放阅读框63抗体
hz-9774R C10orf132/GOLGA7B 10号染色体开放阅读框132抗体
hz-9775R C10orf30/BEND7 10号染色体开放阅读框30抗体
hz-9776R C10orf140 10号染色体开放阅读框140抗体
hz-9777R C1orf125 1号染色体开放阅读框125抗体
hz-9778R C1orf129 1号染色体开放阅读框129抗体
hz-9779R C1orf159 1号染色体开放阅读框159抗体
hz-9780R C1orf163 1号染色体开放阅读框163抗体
hz-9781R C1orf172 1号染色体开放阅读框172抗体
hz-9782R C1orf2/COTE1 1号染色体开放阅读框2抗体
hz-9783R C1orf19/SEN15 1号染色体开放阅读框19抗体
hz-9784R C1orf25 1号染色体开放阅读框25抗体
hz-9785R C1orf31 1号染色体开放阅读框31抗体
hz-9786R C1orf51 1号染色体开放阅读框51抗体
hz-9787R C1orf52 1号染色体开放阅读框52抗体
hz-9788R C1orf67/DNAH14 1号染色体开放阅读框67抗体
hz-9789R C1orf83 1号染色体开放阅读框83抗体
hz-9790R AFAP/AFAP-110 微丝相关蛋白1抗体
hz-9791R C1ORF111 1号染色体开放阅读框111抗体
hz-9792R C1ORF74 1号染色体开放阅读框74抗体
hz-9793R C1QL2/C1QTNF10 补体C1q和肿瘤坏死因子相关蛋白10
hz-9794R C1orf93 1号染色体开放阅读框93抗体
hz-9795R C1orf94 1号染色体开放阅读框94抗体
hz-9796R C1orf96 1号染色体开放阅读框96抗体
hz-9797R C1orf103 1号染色体开放阅读框103抗体
hz-9798R C1orf41/HSB11 1号染色体开放阅读框41抗体
hz-9799R C1orf144 1号染色体开放阅读框144抗体
hz-0112M APP/ABPP 淀粉样肽前体蛋白抗体
hz-9801R C1orf157 1号染色体开放阅读框57抗体