产品参数：
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 产品货号 |
PKD抑制剂（CRT0066101 dihydrochloride） | CRT0066101 dihydrochloride | 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg | BJ-01X8532 |
商品详细介绍：
CRT0066101dihydrochloride是有效，选择性的PKD抑制剂，对PKD1，2和3的IC50值分别为1，2.5和2nM。 注：本品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他用途！ ：1883545-60-5 纯度：98.94% 分子量：374.87 储存条件：-20℃，有效期2年，溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。 |
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤 ：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
大鼠 FCAMR 基因全长ORF克隆1.00671011110113E+19 荧光、比色、化学发光
大鼠 FCGRT 基因全长ORF克隆10016 荧光
大鼠 FCER1G 基因全长ORF克隆5001750113 比色
大鼠 CD31 基因全长ORF克隆50019 比色
大鼠 YWHAE 基因全长ORF克隆1001610135 荧光
大鼠 UCHL1 基因全长ORF克隆101491229812299 荧光
大鼠 CA13 基因全长ORF克隆50017 比色
大鼠 UCHL3 基因全长ORF克隆10155 比色
大鼠 CD4 基因全长ORF克隆10151 比色
大鼠 CCL27 基因全长ORF克隆细氧化应激活性氧（ROS）比色法定量检测试剂盒（羟自由基） 20次
大鼠 WFDC2 基因全长ORF克隆超氧化物歧化（SOD）活性检测试剂盒 50次
PKD抑制剂（CRT0066101 dihydrochloride）ABCA5 三磷酸苷结合盒转运蛋白A亚基5抗体 规格: 0.2mlMCP1/CCL2 单核细胞趋化蛋白1抗体 规格: 0.1ml
CCDC25 卷曲螺旋结构域蛋白25抗体 规格: 0.2ml
phospho-IL-1R1(Tyr496) 磷酸化白介素1受体1抗体 规格: 0.1ml
NR2C/NMDAR2C 谷受体2C抗体 规格: 0.2mlRNF15 环指蛋白15抗体 规格: 0.2ml
Hyaluronidase2 透明质酸2/玻璃酸2抗体 规格: 0.2ml
phospho-KCND2/Kv4.2(Thr607) 磷酸化电压门控性钾通道蛋白Kv4.2抗体 规格: 0.1ml
CYP2E1 细胞色素P450ⅡE1抗体 规格: 0.1ml
NOX5 还原型辅Ⅱ氧化嘌呤二核苷酸磷酸抗体 规格: 0.2ml
Donkey anti-human IgG whole serum 驴抗人IgG抗清 规格: 1mlCBFA1/RUNX2 核心结合因子α1抗体(成骨特异性转录因子)Cbfα1 规格: 0.1ml
LOX-1/OLR1 凝集素样氧化型脂蛋白受体抗体 规格: 0.2ml
BOb-1/POU2AF1 B细胞特异性转录因子抗体 规格: 0.1ml
