鹿内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在鹿内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
16239 免疫球蛋白G(IgG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Immunoglobulin G (IgG) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
16240 白蛋白(ALB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Albumin (ALB) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
16241 血红蛋白(HB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hemoglobin (HB) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
16242 血红蛋白(HB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hemoglobin (HB) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
16243 血红蛋白(HB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hemoglobin (HB) 48T/96T Capra hircus; Caprine (Goat)
16244 血红蛋白(HB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hemoglobin (HB) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
16245 血红蛋白(HB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hemoglobin (HB) 48T/96T Chicken (Gallus)
16246 血红蛋白(HB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hemoglobin (HB) 48T/96T Cavia (Guinea pig )
16247 血红蛋白(HB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hemoglobin (HB) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
16248 血红蛋白(HB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hemoglobin (HB) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16249 血红蛋白(HB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hemoglobin (HB) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
16250 血红蛋白(HB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hemoglobin (HB) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16251 血红蛋白(HB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hemoglobin (HB) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
16252 碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alkaline Phosphatase (ALP) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
16253 转铁蛋白(TRF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transferrin (TRF) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
16254 转铁蛋白(TRF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transferrin (TRF) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
16255 肌浆球蛋白(Myo)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myosin(Myo) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16256 层粘连蛋白(LN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Laminin (LN) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16257 碳酸酐酶Ⅱ(CA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Carbonic Anhydrase II (CA2) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
16258 *1(KLK1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Kallikrein 1 (KLK1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16259 β-乳球蛋白(βLg)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Beta-Lactoglobulin (bLg) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
16260 S100钙结合蛋白A6(S100A6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A6 (S100A6) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16261 S100钙结合蛋白A6(S100A6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A6 (S100A6) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16262 轴突生长诱向因子1(Ntn1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Netrin 1 (Ntn1) 48T/96T Chicken (Gallus)
16263 S100钙结合蛋白A10(S100A10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A10 (S100A10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16264 S100钙结合蛋白A10(S100A10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A10 (S100A10) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16265 S100钙结合蛋白A10(S100A10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A10 (S100A10) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16266 70kDa热休克蛋白8(HSPA8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Heat Shock 70kDa Protein 8 (HSPA8) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16267 绒毛膜*(CG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Chorionic Gonadotropin (CG) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16268 热休克蛋白β6(HSPβ6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Heat Shock Protein Beta 6 (HSPb6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16269 热休克蛋白β6(HSPβ6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Heat Shock Protein Beta 6 (HSPb6) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16270 热休克蛋白β6(HSPβ6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Heat Shock Protein Beta 6 (HSPb6) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16271 磷酸酶张力蛋白同源物(PTEN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phosphatase And Tensin Homolog (PTEN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16272 磷酸酶张力蛋白同源物(PTEN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phosphatase And Tensin Homolog (PTEN) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16273 磷酸酶张力蛋白同源物(PTEN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phosphatase And Tensin Homolog (PTEN) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16274 S100钙结合蛋白A6(S100A6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A6 (S100A6) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
16275 S100钙结合蛋白A6(S100A6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A6 (S100A6) 48T/96T Chicken (Gallus)
16276 胱天蛋白酶8(CASP8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Caspase 8 (CASP8) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
16277 细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Suppressors Of Cytokine Signaling 3 (SOCS3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16278 神经正五聚蛋白受体(NPTXR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuronal Pentraxin Receptor (NPTXR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16279 免疫缺陷伴血小板减少综合征蛋白家族成员2(WASF2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Wiskott Aldrich Syndrome Protein Family, Member 2 (WASF2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16280 胰岛素受体底物1(IRS1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Insulin Receptor Substrate 1 (IRS1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16281 血管非炎性蛋白3(VNN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Vanin 3 (VNN3) 48T/96T Mus musculus鹿内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒 (Mouse)
16282 胰岛素受体底物2(IRS2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Insulin Receptor Substrate 2 (IRS2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5鹿内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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