人肺动脉成纤维细胞

人肺动脉成纤维细胞细菌破壁方法:细菌破壁是成功提取DNA的关键步骤之一。革兰氏阳性菌的肽聚糖层构成坚韧的三维立体结构,而阴性菌肽聚糖层构成疏松的二维结构,因此不同种类细菌的破壁方法不同。目前破壁方法有十二烷基磺酸钠（SDS）裂解法、*法、反复冻融法、研磨法、超声波法等。不同细菌对溶解剂有不同的抗性,溶解细菌前需先取少量菌悬液,加一定浓度的溶解剂,看是否能溶解菌体。
人肺动脉成纤维细胞若SDS和*均能溶解菌体,使用既廉价又能抑制DNase的SDS;若需用*应加入SDS促进溶菌;如果60℃溶菌过程缓慢,可将温度提高到70～75℃;有些菌也可用脱氧胆酸盐破裂细胞膜溶解菌体。对溶解剂有抗性的菌类,可在含*或*的培养基中培养,使其不形成细胞壁。如SDS和酶破壁效果不理想,可同时用反复冻融、超声波或氧化铝和玻璃粉研磨辅助破壁。
Anti-CD117/c-kit/SCFR  干细胞生长因子受体/细胞表面分化抗原抗体
Anti-CD133 antigen  造血干细胞抗原CD133抗体
anti-Syndecan-1/CD138  多配体聚糖抗体
Anti-CD14（cluster of differentiation antigen 14）  CD14抗体
anti-CD28  CD28抗体
Anti-CD144/VECD （Vascularendothelial cell cadherin/VE-cadherin）  上皮型钙粘附分子/血管内皮钙粘蛋白抗体
Anti-CD147/EMMPRIN（Extracellular matrix metalloproteinase inducer）  单核-巨噬细胞基质金属蛋白酶抗体
anti-CD166/ALCAM（activated leukocyte celladhesion molecule）  活化白细胞粘附分子抗体
anti-ED-1  单核/巨噬细胞表面特异性标志抗原抗体
Anti-CD167a/DDR1  CD167a抗体
Anti-CD169/Siglec-1/sialoadhesin（Sn）（Sialic acid-binding Ig-like lectin 1）  CD169抗体
细胞污染解决方法:污染表现是很碎小的黑色聚堆的东西（能想象一堆碎松针堆个圆吗），高倍镜下似乎能动（或者只是物理运动），动作幅度不大，发展较慢，出现后对细胞生长和状态看不出影响，但一旦吹散则发展迅速，污染明显，细胞死亡，培养基发黄. 这是结团的细菌。开始长得很慢，一旦扩散就很快使培养基变浑浊。出现染菌只能丢掉，重新开始培养。不必试图把菌杀死保留细胞，因为这一般无法办到。

高倍镜下看“团”的周围，其实可以看打到很多细菌在不停地“打弯”运动。如果发现得早， 可以尽可能地将其稀释除掉控制的办法就是多开紫外，实验前东西现用现灭，从瓶子里取培养基时多用移液管少用枪头，勤快打扫无菌室。