4D Nucleofector系统 ——多方位的转染平台

产品概述

 
原理
Amaxa^®Nucleofector^®技术是 Lonza(原Amaxa)公司的创新技术，它综合应用传统的电穿孔技术及细胞特异性细胞核转染液，通过调整优化的电转参数（内存转染程序），直接把外源基因导入原代细胞及细胞系的细胞浆和细胞核中。
 
 
外源基因直接导入核内

Normal human dermal fibroblasts –neonatal were nucleofected with 2.5 μg TMR-labeled plasmid DNA encoding eGFP. Fixation of cells was performed after 2 hours with 3.5 % PFA. TMR label is shown in (A), GFP fluorescence in (B), DAPI nuclear staining in (C) and a merge of all three fluorescent labels in (D).
 
 
 
泛细胞类型的高效转染  
 
维持细胞生理功能 Human H9 ES cells preserve pluripotency post Nucleofection. H9 cells were transfected by Nucleofection with the pmaxGFP Vector. (Left) Cells analyzed after 24 hours show expression of GFP (green) as well as of the pluri potency markers SSEA4 (red) and Oct4 (purple). The blue signals refer to nuclear staining by DAPI. (Right) The percentage of double- positive cells (GFP/SSEA) was analyzed by flow cytometry. (Data kindly provided by Jennifer Moore, Rutgers University, Piscataway, USA.)
   
全新的4D Nucleofector^®系统采用模块化设计和导电性聚合物技术，为使用者提供更加灵活的选择和更*的转染性能。
 

• 不同的应用需求，选择不同的细胞数

同一Protocol适用于100μl、20μl两种体积；
100μl电转杯适用于大细胞数(高达2×10⁷)转染；
20μl电转板条适用于小细胞数(低至2×10⁴)转染

• 不同的实验要求，选择不同的通量

灵活的通量选择（1-16样本数）；
1或2个100μl电转杯的平行操作；
1-16个板条孔的平行操作
-      不同的原代细胞类型，5种转染试剂盒供选择
-      原位转染技术实现了生理状态下（贴壁培养过程中）的转染，如Basic Neuron Nucleofector® AD转染试剂盒
-      电极材料：导电性聚合物的应用
 
组成
由Core Unit和X Unit（个上市的功能单元）组成。多种功能单元（Y unit、Z unit）的持续研发和陆续上市。
-  灵活的组装方式：平行拼接或叠放。
-  USB接口与电脑连接：软件升级和数据传送
-  可接驳96孔shuttle转染仪  
的导电性聚合物电转杯和电转板条
-    的导电性聚合物材料替代传统的金属电极
-    克服传统金属电极释放的金属离子（Al³⁺对细胞的毒性）对转染结果的影响。
-    提高（或维持）转染效率的同时，保证细胞的生理特性。
-    规格：满足不同细胞量的转染要求
                                                                                   单孔电转杯（100μl）
                                                                                   16孔电转板条（20μl）
   
技术参数
1、原理：综合应用电穿孔技术和细胞特异性细胞核转染液，可直接将外源基因导入细胞核中。
2、转染程序
   2．1针对不同的细胞类型，内存有优化好的转染程序
   2．2 特异转染程序≥ 160种
   2．3 转染程序可持续升级
 
3、转染液
   *3．1针对不同的细胞类型，提供不同的配套试剂盒，包括三种细胞系试剂盒和五种原代细胞试剂盒
3．2含有细胞特异性细胞核转染液，辅助细胞核转染仪，已达到高效的转染效率和高的细胞存活率
3．3 含有阳性对照质粒 PmaxGFP
4、细胞转染数据库
含针对多种细胞的转染完整操作数据库，包括细胞处理、转染效率、细胞转染后存活率等各方面验证方案。
5、灵活的规格：微量和超大量共存的细胞转染。
   根据实验设置灵活选择不同的转染规格。即可使用100ul电转杯，也可选择20ul电转板条。
5.1 100ul转染体积适用于大细胞数转染（高达2*10⁷/反应），用于转染后的生化应用、WB检测等；
5.2  20ul转染体积适用于小细胞数转染（低至2*10⁴/反应），用于报告基因分析、RNA干扰等。
5.3  不同的转染体积，转染条件可平移，使用同一Protocol。
6. 灵活的通量：低—中等通量（1-16样本数）应实验要求灵活选择。
7、电极材料：的导电性聚合物，提高（或）维持转染效率的同时，保证细胞的生理特性
8. 原位（贴壁）转染：可进行原位（贴壁）转染，改变传统电穿孔技术只能在细胞悬液中进行转染，实现了一些原代细胞在正常生理状态下（即贴壁培养过程中）的转染。
9. 可和96孔细胞核转染仪组合，为其提供脉冲。
10. 可以连接Y unit，直接在标准的24孔培养板中直接进行转染。
 
物理参数

1、电转参数	电流	140 VA  0.4A
	电压	230VAC+10%/-20% ；或110VAC+10%/-20%
	电击时间长短	根据选用程序定时间长短
2、工作频率	50-60Hz，自我调节
3、体积重量	45×10.5×28cm（包括核心单元和X单元）
	8.0kg（包括核心单元和X单元）
4、开机	开机自检

 
   

	基础平台	高级平台	96孔平台	高通量平台
设备名称	Nucleofector 2b 单孔细胞核转染仪	4D-Nucleofector system 4D细胞核转染系统	Nucleofector 96-well shuttle 96孔细胞核转染仪	HT Nucleofector system 高通量细胞核转染系统
设备图片
通量	低通量（1孔）	低-中通量（1-16孔）	低-中通量（1-96孔）	高通量（384孔）
体积	100μl	20μl+100μl	20μl	20μl
电极材料	铝离子	导电聚合物	导电聚合物	导电聚合物
小细胞数(20μl)	--	2 x 104 --- 1 x 106	2 x 104 --- 1 x 106	2 x 104 --- 1 x 106
大细胞数(100μl)	2 x 105 --- 2 x 107	2 x 105 --- 2 x 107	--	--
原位转染 (20μl电转板条)	--	√	√	--
与96孔shuttle兼容性	IIS版本兼容 IIb和IIN不兼容	√	--	--