细胞名称BE(2)-M17（人神经母细胞瘤细胞）
种属人
年龄（性别）男；2岁
组织来源
生长特性贴壁
细胞形态神经母细胞样
背景描述BE(2)-M17细胞是源自一位2岁患有神经母细胞瘤男童的骨髓，是SK-N-BE(2)神经母细胞瘤的一个克隆；BE(2)-M17细胞多层生长，随着培养时间细胞会聚集、漂浮。
生长培养基MEM/F12＋10%FBS＋1%P/S
培养条件气相：空气，95%；CO2，5%温度：37℃
常见问题
1.收货时细胞出现伪足，或是碎片较多怎么办？
受到运输影响，悬浮细胞会短暂性出现形态改变的现象，如伪足等。通过传代培养，1周左右可以恢复正常。一些细胞在运输途中死亡而产生碎片，通过传代离心可以去除（见上文传代篇）。
2.培养过程中细胞发生贴壁怎么办？
少量细胞贴壁属于正常情况，将细胞悬液转移至新瓶中即可。当贴壁细胞的比例高于20%，说明细胞生长环境有异常，需排查培养箱设置、培养基成分，以及培养器皿是否异常。
3.培养过程中细胞发生聚团怎么办？
少量细胞聚团，呈葡萄串状，属于正常现象，特别是细胞密度较低时，易出现这种情况。更换血清品牌或增大血清比例（不超过20%）有助于解决聚团问题。不建议将聚团的细胞吹散，等待密度高时，会自己分散开。
4.培养基里一定要加β-巯基乙醇吗？
β-巯基乙醇是一种常用的培养补充剂，有抗氧化的作用，可减少氧化应激对THP-1细胞的影响。当细胞密度过大但需要维持时，可适当增加巯基乙醇的比例（不超过标准量的1.5倍）。
5.镜下观察时，难以聚焦或估算密度怎么办？
悬浮细胞会随着液体流动，不容易聚焦，静置5-10分钟使细胞沉底，之后在轻轻放上显微镜观察，将有助于聚焦和估算细胞密度。
|注意事项
1.细胞养不好，可能的原因有，THP-1细胞特别依赖细胞浓度，ATCC上10 5到106每ML，是一个很高的密度，细胞少了就不太容易养好。
2.细胞株的来源很重要，如直接来源于ATCC（American Type Culture Collection美国模式菌种保藏中心）生命力要强于国内细胞库的。
3.注意细胞的密度一定要高，介于5×10^5——10^6/mL之间，增值的快。细胞数量太少，不适合THP-1生长，一般状态不好的THP-1在培养了3天后数量仍然不多，继续培养一天或者两天，培养基严重泛黄，细胞数会增加。这一点不同于同是单核细胞系的U937细胞。
4.THP-1细胞适合在细胞Ph环境偏酸性环境生长，对培养基变化非常敏感，所以尽量使用相同Ph的1640。
5.传代后切忌常移出培养箱观察，否则会影响细胞生长，状态变差，一般首先表现为细胞内颗粒变多。一般THP-1生长相当快，对于状态已经不好的情况，建议传代后3～4天再观察，一般4天时间培养基已明显泛黄，细胞数量巨增;1)THP-1细胞喜欢酸性条件，你不要老是换培养基。越酸的条件，细胞密度越大，细胞就长得越好;2）不要频繁换液，一般2-3次换液离心一次（只是补充培养基）3）使用1640（ATCC推荐），注意加碳酸氢na2.5g就可以了，宁酸勿碱;4）注意冻存的时候密度大些，推荐用血清冻存。
6.复苏比较慢，建议开始用小瓶，不要用一次性的。
智立中特（武汉）生物科技有限公司主要致力于质粒微生物资源的保护、共享和持续利用，围绕我国生命科学研究、生物技术创新和产业发展等重大需求，探索、发现、收集国内外的微生物资源，妥善长期保存管理；在保证生物安全和保护知识产权的前提下，为工农业生产、卫生健康、环境保护、科研教育提供质粒载体物物种资源、基因资源、信息资源和专业技术服务。旗下质粒载体网是一款提供质粒载体展示及定制的专业型网站，由智立中特（武汉）生物科技有限公司联合多家企业公司科研院校共同打造！主要展示了各种基因类型下的质粒载体！
我们的工作主要包括：广泛分离、收集、保藏、交换和供应各类微生物质粒菌种；保存用于专li程序的各种可培养生物材料；质粒载体类保藏技术研究；微生物分离、培养技术研究；微生物鉴定和复核技术研究；保藏菌种的资料情报收集和提供及编辑微生物菌种目录。
目前保存各类载体资源超过20000余种，质粒微生物约5000株，另外我们还代理国外微生物菌种资源，如addgene，安捷伦，thermo，atcc等。
信息简介如下：
Addgene是一个公益性组织，它负责保存和提供质粒。科学家发表文章如果涉及到质粒，会发一份到Addgene保存，其他科学家如果需要这个质粒，可以向Addgene索取。
ATCC成立于1925年，是世界shang 最da的生物资源中心，由美国14家生化、医学类行业协会组成的理事会负责管理，是一家全qiu性、非盈利生物标准品资源中心。ATCC向全qiu发布其获取、鉴定、保存及开发的生物标准品，推动科学研究的验证、应用及进步。
安捷伦为基因组学领域的各种应用提供丰富的高质量工作流程解决方案。您可以找到支持或扩展实验室所需的一切，包括样品质量控制(QC)、二代测序(NGS)文库制备和靶向序列捕获、微阵列芯片、CRISPR、PCR/qPCR、生物试剂以及数据分析解决方案（包括解析和报告）。
Thermo Fisher Scientific旗下GeneArt质粒构建服务可快速、可靠地生成具有独te应用特征的专用质粒。根据需要使用复杂的克隆方法，帮助您开发完quan定制的载体，并保留与所得表达质粒相关的所有知识产权。,如果所需质粒载体不可用，无论是从商业上还是通过您的研究网络，我们都可以为您提供帮助。GeneArt™基因合成平台可通过模块化、易于互换的片段编码调节和功能元件，或使用定制元件来设计质粒载体。在某些情况下，这些单独的“模块”可以通过PCR扩增获得，也可以通过合成产生。合成载体元件也可定制，使其囊括几乎任何已知的调节或功能元件，满足您的独te需求。
