还原酶底物 Resazurin Sodium Salt
摘要:为分析催化四联体中关键氨基酸突变对黄鳝醛酮还原酶活性的影响,利用重叠PCR对黄鳝Eakr基因进行了A81K定点突变,将突变基因亚克隆至p ET-28a(+)构建了重组表达载体.重组载体转化BL21(DE3)菌株后经IPTG诱导,镍离子柱亲和层析获得了突变型蛋白(EakrA81K);以NADPH为辅酶,分析了突变型蛋白EakrA81K的底物谱,并比较了野生型(Eakr)和突变型蛋白(EakrA81K)对不同底物的还原活性;后,以甲醛为底物比较了野生型和突变型蛋白的适反应温度和适p H.结果表明:EakrA81K对醛类物质以及中长链酮类物质具有较高的还原活性,而对醇,糖,酸类物质没有活性;A81K位点突变使得黄鳝醛酮还原酶和底物之间的亲和力增加,并了酶对大部分底物的还原活性;突变稍降低了黄鳝醛酮还原酶的酸度耐受能力但了该酶的温度耐受能力.这暗示着黄鳝醛酮还原酶Eakr的81位氨基酸在底物识别上具有重要作用.
还原酶底物 Resazurin Sodium Salt
荧光染料resorufin可用于检测细胞内的还原活性,已用于检测(1,2)和线粒体代谢活性。瑞苏林本身在还原为高红色荧光瑞苏芬(λEx/λEm:563/587 nm)之前是非荧光的。通常,NADPH或NADH是还原剂,在黄递酶的存在下将瑞苏林转化为瑞苏芬。因此,resazurin可用于检测NADH、NADPH或黄递酶水平。此外,resazurin/黄递酶/NADPH系统可用于检测产生NADH或NADPH的生化反应中涉及的生化或酶活性(3-9)。尽管大多数化学品供应商都提供瑞苏林,但微量的瑞苏芬污染物往往使材料不适合用于生物测定
名称:Resazurin,Sodium Salt
形状:暗固体
溶解性:不溶于二甲基亚砜或水
储存条件:储存于4°C,避光
分子式:C12H6NNaO4
分子量:251.17
【类别】:酶底物
【纯度】:99%
【说明】:可定制
【货期】:3天
【厂家】:西安齐岳生物
【图谱】:提供核磁,HPLC,LCMS,GC图谱
供应商:西安齐岳生物科技有限公司
温馨提醒:供科研,不能用于人体实验
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温馨提示:西安齐岳生物供应产品用于科研,不能用于人体 zl 02.03