商品介绍:
测定意义
样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。此外,可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。
测定原理:
碱性条件下,蛋白质中肽键,能将Cu2+还原成Cu+;2分子的BCA与Cu+结合,生成紫色络合物,在540-595nm有吸收峰,562nm处吸收峰*。
自备仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、1 mL玻璃比色皿/96孔板、移液器和蒸馏水。
产品属性:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
BCA蛋白法含量检测试剂盒可见分光光度法 | 可见分光光度法 | 50管/48样 | FS-01S63849 |
产品内容:
酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
碱性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 1.5mL×1 支,4℃保存
试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存,用时加入 1.6mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂四:粉剂×1 支,4 ℃保存,用时加入 1.9mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂五:液体 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
试剂六:液体 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
试剂七:自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。
NAD 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。
NADH 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。
操作步骤:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min;取上清 200uL,加入等体积碱性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 碱性提取液,煮沸 5min(盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
2、组织中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积碱性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 碱性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 碱性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
注意事项:
1、公司产品仅用于科研操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加,必须分开加。
2、反应过程要注意避光。
3、当吸光值大于 1 时,建议稀释后测量,计算公式中应当乘以稀释倍数。
下列是公司正在热销的产品:
豚鼠补体因子4 (C4)试剂盒Anti-INSR Antibody凝血(II)激活肽1抗体
豚鼠神经粘附分子(NCAM/CD56)试剂盒Anti-INSR Antibody凝血(II)激活肽2抗体
豚鼠多巴受体D2(D2R/DRD2)试剂盒 Anti-Integrin alpha V/ITGAV AntibodyTafazzin蛋白抗体
豚鼠cGMP依赖性蛋白激I (PRKG1)试剂盒Anti-Integrin beta 4/ITGB4 AntibodyTEC酪激蛋白抗体
豚鼠转铁蛋白受体(TFR/CD71)试剂盒Anti-Integrin beta 5/ITGB5 Antibody钙转运蛋白1抗体
豚鼠蛋白激C(PKC)试剂盒Anti-IQGAP1 Antibody金属蛋白组织抑制因子-2抗体
豚鼠凝血/抗凝血复合物(TAT)试剂盒Anti-IQGAP1 Antibody肿瘤坏死因子配体超家族成员19抗体
豚鼠多形核白弹性蛋白(PMN Elastase)试剂盒Anti-IQGAP2 Antibody肿瘤坏死因子配体超家族成员9抗体
豚鼠胆调节元件结合蛋白(SREBP)试剂盒Anti-IRAK1 Antibody转抗体
豚鼠血小板激活因子ib3(PAFAHIB3)试剂盒Anti-IRAK1 AntibodyTATA框结合蛋白关联因子12抗体
豚鼠双肾上腺皮质样激1(DCLK1)试剂盒Anti-IRAK2 Antibody转录延伸因子B2抗体
豚鼠硫氧化还原蛋白(Trx)试剂盒Anti-IRAK1 Antibody兔抗甲状腺球蛋白
豚鼠半乳凝集8(GAL8)试剂盒Anti-IRAK2 Antibody肿瘤坏死因子α诱导蛋白3抗体
豚鼠可溶性血纤蛋白单体复合物(sFMC)试剂盒Anti-IRAK3 Antibody瞬时受体电位离子通道蛋白/M亚家族抗体
豚鼠CD163分子(CD163)试剂盒Anti-IRAK3 Antibody肿瘤抑制转移候选基因3抗体
BCA蛋白法含量检测试剂盒可见分光光度法硝钴,六水 ACS唑标准溶液 0.100mg/mlFE(Mouse ferritin) ELISA KIT 小鼠铁蛋白
间甲紫 Indicator氟离子(F-)标准溶液 1000mg/L,基体:水CA-2(Mouse carbonic anhydrase 2) ELISA KIT 小鼠碳酐2
氯化镉,无水 AR ,99%氟化物标准溶液 39.5mg/L,基体:NaOHPEDF(Mouse pigment epithelium-derived factor) ELISA KIT 小鼠色上皮衍生因子
氯化镉,无水 ACS氟化物标准溶液 12.8mg/L,基体:NaOHADAM8(Mouse A Disintegrin And Metalloprotease 8) ELISA KIT 小鼠解整合样金属蛋白8
氯化镉,无水 99.99% metals basis氟化物标准溶液 25.0mg/L,基体:NaOH AT(Mouse Anti-trypsin) ELISA KIT 小鼠抗胰蛋白
硝铬 CP,98.0%氟戊菊酯 1.00mg/mlICA(Mouse islet cell antibody) ELISA KIT 小鼠胰岛抗体
硝铬 AR,99.0%氯嘧标准溶液 100 μL/mL ,基质:甲Kim-1(Mouse Kidney injury molecule 1) ELISA KIT 小鼠肾损伤分子1
硝铬 99.99% metals basis氯嘧 分析标准品AMA(Mouse anti-Monocyte antibody) ELISA KIT 小鼠抗单核抗体