商品介绍:
测定意义
蔗糖不仅是重要的光合产物,也是植物体内运输的主要物质,还是碳水化合物的贮存形式之一。SPS(EC 2.4.1.14)以果糖-6-磷酸为受体,形成的蔗糖磷酸在蔗糖磷酸酶的作用下形成蔗糖。一般把蔗糖磷酸酯合成酶-蔗糖磷酸酶系统看作是蔗糖合成的主要途径。
测定原理
蔗糖磷酸合成酶催化果糖-6-磷酸形成蔗糖磷酸,蔗糖磷酸与间苯二反应可呈现颜色变化,在480nm下有特征吸收峰,酶活力大小与颜色的深浅成正比。
需自备的的仪器和用品
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、离心机、移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研钵、冰
产品属性:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
SPS蔗糖磷酸合成酶可见分光光度法 | 可见分光光度法 | 50管/24样 | FS-01S63588 |
产品内容:
酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
碱性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 1.5mL×1 支,4℃保存
试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存,用时加入 1.6mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂四:粉剂×1 支,4 ℃保存,用时加入 1.9mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂五:液体 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
试剂六:液体 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
试剂七:自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。
NAD 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。
NADH 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。
操作步骤:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min;取上清 200uL,加入等体积碱性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 碱性提取液,煮沸 5min(盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
2、组织中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积碱性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 碱性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 碱性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
注意事项:
1、公司产品仅用于科研操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加,必须分开加。
2、反应过程要注意避光。
3、当吸光值大于 1 时,建议稀释后测量,计算公式中应当乘以稀释倍数。
下列是公司正在热销的产品:
促胰液尿激型纤溶原激活物受体secretin
糜蛋白尿激型纤溶原激活物chymotrypsin
甘油三酯血管生成受体/含球蛋白样环和上皮生长因子样域酪激2Triglyceride
谷丙转基质金属蛋白8/中性粒胶原Alanine transaminase
基质金属蛋白7cholesterol
谷草转基质金属蛋白3Aspartate amino-transferase
球蛋白基质金属蛋白2/明胶Aglobulin
超氧化物歧化基质金属蛋白13Super Oxidase Dimutase
谷丙转基质金属蛋白10Alanine transaminase
*基质金属蛋白1Catalase
性磷FMS样酪激3alkaline phosphatase
S1核FMS样酪激3配体Nuclease,single-strandednucleate endo-
肉脂酰转移血管紧张转化Carnitine palmitoyltransferase
肉脂酰转移α1微球蛋白/bikunin前体Carnitine palmitoyltransferase
脂肪合成PodocinFatty acid synthase
SPS蔗糖磷酸合成酶可见分光光度法氧化铝 ,晶型α,θ 2,4-二羟基吡 97%human-VEGF-D 大鼠血管内皮生长因子D
氧化铝 99.99% metals basis,α晶型约95%,晶型γ约5%,80nm对异基 98%VEGF-R1 大鼠血管内皮生长因子受体1
氧化铝 99.99% metals basis,α晶型约90%,晶型γ约10%,50nmL(+)-2-基-4-溴丁氢盐 98%VEGF-R2 大鼠血管内皮生长因子受体2
三聚硫 95%(S)-α-基- 盐盐 97%UPAR 大鼠尿激样纤溶原活化物受体
二硫化四甲基秋兰姆 97%1-基-1-环己 98%TH1/TH2 大鼠内因子
二硫化四甲基秋兰姆 分析标准品1-基环烷羧 98%HLA-G 大鼠白抗原G
氯乙烯基镁 1.6 M in THF(R)-3-基-3-基 95%, 98%eeCTGF 大鼠结缔组织生长因子
D-葡萄糖内酯 99%(S)-3-基-3-基 95%,98%eeMIP-1 Alpha 大鼠巨噬炎性蛋白-1α









