商品介绍:
测定意义
莽草酸途径是存在于植物、真菌和微生物中的一条重要的代谢途径,莽草酸脱氢酶是莽草酸合成途径中的关键酶。
测定原理:
莽草酸脱氢酶催化莽草酸和NADP产生NADPH,检测340nm下的吸光值增加速率来表示SD活性。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
产品属性:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
SD莽草酸脱氢酶检测试剂盒微量法 | 微量法 | 100管/96样 | FS-01S63833 |
产品内容:
酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
碱性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 1.5mL×1 支,4℃保存
试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存,用时加入 1.6mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂四:粉剂×1 支,4 ℃保存,用时加入 1.9mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂五:液体 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
试剂六:液体 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
试剂七:自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。
NAD 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。
NADH 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。
操作步骤:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min;取上清 200uL,加入等体积碱性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 碱性提取液,煮沸 5min(盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
2、组织中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积碱性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 碱性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 碱性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
注意事项:
1、公司产品仅用于科研操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加,必须分开加。
2、反应过程要注意避光。
3、当吸光值大于 1 时,建议稀释后测量,计算公式中应当乘以稀释倍数。
下列是公司正在热销的产品:
猴胎盘催乳(PL)联免疫试剂盒 枯草芽胞杆Thymidine Kinase 1 Antibody
猴抗核膜糖蛋白210抗体(AGPA)联免疫试剂盒 多毛孢ProLong®Gold Antifade Reagent with DAPI
猴孕烷受体(PXR)联免疫试剂盒豇豆慢生根瘤Human BAFF/TNFSF13B (hBAFF)
猴突触核蛋白α(SNCα)联免疫试剂盒 香菇(L087)PLA2G1B Antibody
猴胎球蛋白B(FETUB)联免疫试剂盒 MarisediminicolaSignalSilence® NDP52 siRNA I
猴血小板衍生生长因子AA(PDGF-AA)联免疫试剂盒苏云金芽孢杆松蠋亚种RARγ1 (D3A4) XP® Rabbit mAb
猴多巴转运蛋白(DAT)联免疫试剂盒产克雷伯氏RARγ1 (D3A4) XP® Rabbit mAb
猴球蛋白G Fc段低亲和力受体IIIb(FcγR3B)联免疫试剂盒 玉蜀黍赤霉HNF1α (D7Z2Q) Rabbit mAb
猴生长调节致癌基因α(GROα/CXCL1/NAP3)联免疫试剂盒 螺卷毛壳(只确定属)NuMA (D49H4) Rabbit mAb
猴纤维母表面抗原(FSP)联免疫试剂盒 松口蘑CASK (D24B12) Rabbit mAb
猴X组磷脂A2(PLA2G10)联免疫试剂盒谷棒杆Apaf-1 (D5C3) Rabbit mAb
猴XIV型胶原 (COL14)联免疫试剂盒秦氏蜜环Apaf-1 (D5C3) Rabbit mAb
猴外信号调节激(ERK)联免疫试剂盒 枯草芽孢杆PAX5 (D19F8) XP® Rabbit mAb
猴谷胱S转移θ2(GSTθ2/GSTt2)联免疫试剂盒黑曲霉PAX5 (D19F8) XP® Rabbit mAb
猴生长分化因子11(GDF11)联免疫试剂盒栗酒裂殖酵母SimpleChIP® Human Axin2 Intron 1 Primers
SD莽草酸脱氢酶检测试剂盒微量法硝亚汞,二水 AR标准溶液容量分析用,0.1000mol/LACA(Mouse anti-centrol and centrosome antibody)ELISA Kit 小鼠抗中性粒/中心体抗体
硝亚汞,二水 GR碳钠容量分析用溶液标准物质 1/2Na2CO3:0.1000mol/LHpt/HP(Mouse Haptoglobin)ELISA Kit 小鼠结合珠蛋白/触珠蛋白
氯化基汞 98%GC-ECD测试标准物质 体-六六六:34.0ng/μL,:33.0ng/μL,16- Alpha OHE-1(Mouse 16- AlphaHydroxyestrogen 1)ELISA Kit Hpt/HP小鼠16α羟基雌酮1
二氧化锰 GR,91%GC-FID测试标准物质 300ng/μLAlpha1-AGP(Mouse Alpha1-Acid glycoprotein)ELISA Kit 小鼠α1性糖蛋白
甲基红 AR正十六烷标准溶液100ng/ul溶剂:异辛烷,GC-TCD测试标准物eNOS-3(Mouse Endothelial nitric oxide synthase 3)ELISA Kit 小鼠内皮型一氧化氮合成3
甲基红 ACSICP光谱仪检定溶液标准物质 基体:3%HNO3CETP(Mouse cholest erolester transfer protein)ELISA Kit 小鼠胆酯转移蛋白
甲基红 IndicatorICP光谱仪检定溶液标准物质Cr、Ni、Zn:2.00ug/ml Cu、Ba、Mn:1.0LH(Mouse luteotropic hormone)ELISA Kit 小鼠促黄体
柠檬镁 ARICP光谱仪检定溶液标准物质Cr、Ni、Zn:5.00ug/ml Cu、Ba、Mn:2.5aGT(Mouse angiotensinogen)ELISA Kit 小鼠血管紧张原









