名 称：N端中段骨钙素（酶联免疫检测法）
规 格：96T/48T
说明书：48孔配置一份/96孔配置一份
用 途：仅供使用
服 务：多年代测服务，质量保证
品 牌：酶联生物
操作步骤：
1．取出试剂盒，室温（20-25℃）放置30分钟。
2．分组：取出96孔板，根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，把剩余的板条继续冷藏处理，分别设标准品组（6个浓度）、空白孔、待测样品组。
注：为减少实验误差，保证准确性，建议设置复孔。
3．加样：依照标准品的顺序分别加入50ul的标准品溶液于空白微孔中，空白对照孔加入50ul的蒸馏水；其余微孔中加入50ul的待测样本。
4．加酶标溶液：标准品组、待测样本组各孔中加入100ul的酶标溶液（空白对照孔除外）。
5．温育：酶标板用封板纸密封后，放入湿盒内于37℃恒温孵育1小时。
6．洗板：用稀释后的洗涤液注满每孔，静置15-30s，充分清洗酶标板5次，用吸水纸*拍干。
7．显色：各孔加入显色剂A液50ul后，再加入显色剂B液50ul。
8．终止：25-37℃下避光反应10-15分钟，加入50ul终止液。
9．读板：在450nm波长读取各孔的OD值。
实验规则：
1、要保证移液枪的准确性，误差不能超过2%，可用水和电子天平进行确定，但有专业人员进行矫正。
2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支，吸取不同的液体后，要更换枪头，即使是吸取标准品时。
3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出，使各种试剂都恢复到室温，以使结果更稳定。
4、实验时，要使底物避光保存。
5、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
6、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
7、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
8、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体，也可以用酶标仪的晃动功能。
9、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
10、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*，没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
11、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液，加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
12、底物是光敏感的，要在临用前现配。
13、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
14、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
15、待检样品要澄清，否则会影响结果。
16、温浴时间应遵守试剂盒规定。
17、应尽量做双孔实验，这样才能保证数据的准确性。
18、对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。
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