冷冻保存细胞之方法:
人结直肠腺癌细胞;LoVo图片冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
产品描述:
细胞名称 人结直肠腺癌细胞;LoVo图片
形态特性上皮细胞
生长特性贴壁生长
特征特性LoVo建自1971年,从诊断为结肠腺癌的56岁男性白人的一个转移到左锁骨上区的肿瘤结节建系。癌基因C-myc,K-ras,H-ras,N-ras,Myb,sis和fos的表达呈阳性。癌基因N-myc的表达未做检测。它在裸鼠中能成瘤。与107细胞联合皮下接种5只裸鼠21天后全部成瘤。表达肿瘤特异的核基质蛋白蛋白CC-3和CC-4。
培养条件F12K优质胎牛血清,10%
传代方法消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况P(29+5)
冻存条件*培养基+8%DMSO
支原体检测阴性
STRAmelogenin:X,Y;CSF1PO:10,11,13,14;D13S317:8,10,11;D16S539:9,12;D18S51:13,18;D19S433:14,15;D21S11:29,31.3;D2S1338:17,18;D3S1358:14,16,17,18;D5S818:11,13;D7S820:9.3,10,11;D8S1179:10;FGA:18,20;TH01:9.3;TPOX:8,9;vWA:17,18
同工酶
染色体
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)人结直肠腺癌细胞;LoVo图片准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
注意事项:
1.一般客户拿到人结直肠腺癌细胞;LoVo图片后,应该注意什么?
客户收到细胞先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞时的培养基拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
细胞出现问题,不予以重发的情况有哪些?
(1)客户造成细胞污染,不重发;
(2)客户不正确操作致细胞状态不好,不重发;
(3)非推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发;
(4)细胞状态不好,未提供细胞培养前3天照片的,不重发;
(5)细胞培养时经其它处理的,不重发;
(6)细胞收到2天内,未告知,不重发;
(7)视具体情况而定。
*Anti-AMPKbeta-1(phosphoSer182)/FITC荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶β1抗体IgG规格:0.2ml
*Anti-AMPKBeta1/FITC荧光素标记腺苷单磷酸活化蛋白激酶β1抗体IgG规格:0.2ml
*Anti-Amylin/FITC荧光素标记兔抗糖尿病相关肽/胰岛淀粉样肽抗体IgG规格:0.2ml
*Anti-Ang-II/FITC荧光素标记血管紧张素II抗体IgG规格:0.2ml
*Anti-ANG-2/FITC荧光素标记血管生成素-2抗体IgG规格:0.2ml
*Anti-AnkyrinG/ANK-3/ankyrin3/FITC荧光素标记锚定蛋白G抗体IgG规格:0.2ml
*Anti-ANGPTL1/ANG-1/FITC荧光素标记血管位蛋白样1/血管生成素样蛋白-1抗体IgG规格:0.2ml
*Anti-ANGPTL2/ANG-2/FITC荧光素标记血管位蛋白样2/血管生成素样蛋白-2抗体IgG规格:0.2ml
*Anti-ANGPTL4/ANG-4/FITC荧光素标记血管位蛋白样4/血管生成素样蛋白-4抗体IgG规格:0.2ml
*Anti-AnnexinI/FITC荧光素标记人、大、小鼠膜粘连蛋白I抗体IgG规格:0.2ml
人结直肠腺癌细胞;LoVo图片*Anti-NT-3神经营养因子-3抗体规格:0.1ml
*Anti-NT-4/NT-5神经生长因子4/5抗体规格:0.1ml
*Anti-MT-ND1NADH复合体1抗体规格:0.2ml
*Anti-NTCP钠离子/牛磺胆酸共转运蛋白规格:0.2ml
*Anti-Neurturin神经生长因子抗体规格:0.1ml
*Anti-Ntn1轴突导向因子1抗体规格:0.2ml
*Anti-Nur77/GFRP孤儿核受体蛋白Nur77抗体规格:0.2ml
*Anti-Phospho-Nur77(Ser351)磷酸化孤儿核受体蛋白Nur77抗体规格:0.1ml
*Anti-NuMA核有丝分裂器NuMA蛋白抗体规格:0.2ml
*Anti-Phospho-NuMA(Ser395)磷酸化核有丝分裂器NuMA蛋白抗体规格:0.1ml
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