丙酮酸羧化酶试剂盒说明书样品制备:
1). 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品,体积可达2.000ml。
2). 过滤混浊溶液。
3). 除去样品中的CO 2 (丙酮酸羧化酶试剂盒说明书过过滤)。
4 ). 丙酮酸羧化酶试剂盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ). 调整酸性浅色样品的PH值至8.0,孵育约15分钟。
6 ). 用空白样品做对照测定有色样品(如有必要调整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ). 压碎、搅匀固体或半固体样品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10).含脂肪的样品用热水提取。
产品名称:丙酮酸羧化酶试剂盒说明书
规格:100管/96样
测试方法:微量法
测定意义:丙酮酸羧化酶(pyruvate carboxylase,PC,EC 6.4.1.1)广泛存在于动物、霉菌和酵母的线粒体中,催化丙酮酸、ATP、CO2和水生成草酰乙酸、ADP和Pi,是糖异生过程的*个限速酶,在保证血糖的动态平衡方面起着重要的作用。
丙酮酸羧化酶试剂盒说明书样品测定的准备:
1、细胞、细菌或组织样品的制备 :
细菌或细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,弃上清;按照每100万细菌或细胞加入1mL提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率20%,超声3秒,间隔10秒,重复30次),之后置沸水浴振荡提取10min;10000g,常温离心10min,取上清,冷却后待测。
组织:称取约0.1g组织,加入1mL提取液进行冰浴匀浆;之后置沸水浴振荡提取10min,10000g,常温离心10min,取上清,冷却后待测。
2、血清(浆)样品:取100μL血清(浆)加入1mL提取液,充分混匀,之后置沸水浴振荡提取10分钟,10000g,常温离心10分钟,取上清,冷却后待测。
3、标准品的处理:称取1mg,将标准品稀释为15、10、8、6、4、2、1、0 μg/ml。
丙酮酸羧化酶试剂盒说明书测定步骤:
1、分光光度计预热30min以上,调节波长至520nm,蒸馏水调零。
2、取0.5mL上清液(或稀释后的标准品)+0.5mL试剂一+0.5mL试剂二于有盖试管中,置沸水浴中保温30min(盖紧,防止水分散失),每10min振荡一次。
3、待冷却后,在试管中加入1mL试剂三,振荡30s,静置片刻,使色素转至试剂三;吸取0.8mL-1mL上层溶液于1mL玻璃比色皿中,用试剂三调零,于520nm波长处比色,记录吸光值。
4、根据标准品吸光值和浓度,建立标准曲线。
2--5-甲基噻吩 分类: 化学,固相合成,
4-戊基* 分类: 化学,合成试剂,
2,6-二羟乙氨基甲苯 分类: 化学,合成试剂,
环丁烷甲酸乙酯 分类: 化学,合成试剂,
4-甲烷磺酰苯硼酸 分类: 化学,合成试剂,
4-氯-4-氧代丁酸甲酯 分类: 化学,合成试剂,
AMP钠盐 分类: 化学,合成试剂,
beta-紫罗兰酮 分类: 化学,合成试剂,
1,2,3-三氟苯 分类: 化学,合成试剂,
N-乙基-N-苯胺 分类: 化学,合成试剂,
5-氯-2-甲基苯硼酸 分类: 化学,合成试剂,
N-Boc-3-哌啶甲酸甲酯 分类: 化学,合成试剂,
N-乙基-N-基间甲苯胺 分类: 化学,合成试剂,
丁酸叶醇酯 分类: 化学,固相合成,
2,6-二氯-3-吡啶 分类: 化学,合成试剂,
二叔丁基叠氮草酸 分类: 化学,固相合成,
2-哌啶乙醇 分类: 化学,合成试剂,
3-苄氧基苯胺 分类: 化学,合成试剂,
1-(2-苯并呋喃基)乙酮 分类: 化学,固相合成,
环吡酮杂质B 分类: 化学,合成试剂,
1-芘硼酸 分类: 化学,固相合成,
*三萜酸 A 分类: 标准品,中药标准品,
Trilobatin 2''-acetate 分类: 标准品,中药标准品,
Trichokaurin 分类: 标准品,中药标准品,
Tetrahydrolachnophyllum lactone 分类: 标准品,中药标准品,
Tetrachyrin 分类: 标准品,中药标准品,
绣线菊碱 F 分类: 标准品,中药标准品,
Spegatrine 分类: 标准品,中药标准品,
Sequosempervirin B 分类: 标准品,中药标准品,
Sanggenol A 分类: 标准品,中药标准品,
Prionitin 分类: 标准品,中药标准品,
Palbinone 分类: 标准品,中药标准品,
Paeonilactone B 分类: 标准品,中药标准品,
Olivil monoacetate 分类: 标准品,中药标准品,
米仔兰酸碱 分类: 标准品,中药标准品,
米仔兰碱 分类: 标准品,中药标准品,
Norscopolamine 分类: 标准品,中药标准品,
丙酮酸羧化酶试剂盒说明书苦瓜皂苷 G 分类: 标准品,中药标准品,
Marmin 分类: 标准品,中药标准品,
Maoyerabdosin 分类: 标准品,中药标准品,
Magnolignan A 分类: 标准品,中药标准品,
Macusine B 分类: 标准品,中药标准品,
大果桉醛 A 分类: 标准品,中药标准品,
丙酮酸羧化酶试剂盒说明书ELISA实验丙酮酸羧化酶试剂盒说明书用规则
1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可*保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加*。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。