2019年03月22日 10:45上海抚生实业有限公司点击量：506
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中髓性细胞核分化抗原（MNDA）水平。用纯化的人髓性细胞核分化抗原（MNDA）捕获抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被的微孔中依次加入人髓性细胞核分化抗原（MNDA），再与HRP标记的检测抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的人髓性细胞核分化抗原（MNDA）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人髓性细胞核分化抗原（MNDA）含量。
（MNDA）elisa检测试剂盒操作步骤
标准品的加样：设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；。
加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
加酶：每孔加入酶标试剂100μl，空白孔除外。
温育：用封板膜封板后置37℃温育60分钟。
配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
注意事项：
（MNDA）elisa检测试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
请每次测定的同时做标准曲线，尽量做做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以总稀释倍数（×n×5）。
封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
底物请避光保存。
严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
（MNDA）elisa检测试剂盒不同批号组分不得混用。
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