中文名称:鞭毛染色液(Leifson法)
英文名称:
产品规格:3×50ml
产品货号:BJ-01X6913
用途: 鞭毛染色 注意事项: 又叫利夫森氏染色法,主要由鞣酸、碱性品红等组成,染色后菌体和鞭毛呈红色。 储存条件:室温,避光,12个月 |
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备F-12K培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
细胞培养方法:
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
Trypanosoma simiae猿猴锥虫LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周COMMD9 铜代谢结构域蛋白9抗体 规格: 0.2ml
Turkey Astrovirus(TAstV)火鸡星状病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周phospho-NFATc2(Ser326) 磷酸化核因子活化T细胞胞浆蛋白2抗体 规格: 0.1ml
Influenza Virus A甲型流感()病毒H5N8亚型RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用) 50次 低温 负20度 一年 2-4周membrane glycoprotein E(VZV) 人水痘带状疱疹毒gE蛋白抗体 规格: 0.2ml
水牛源性成分LAMP试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周CRTAM CRTAM抗体 规格: 0.2ml
Hemorrhagic Fever with Renal Syndrome Virus(HFRSV)肾综合症出血热病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Islet 1 胰岛素基因增强结合蛋白1抗体 规格: 0.2ml
Potato Yellow Dwarf Virus(PYDV)马铃薯黄矮病毒RT-PCR试剂盒 植物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周GHR 生激素受体抗体 规格: 0.1ml
Caulis spatholobi鸡血藤PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周C22orf36 22号染色体开放阅读框36抗体 规格: 0.2ml
Avian Leukosis Virus(ALV)禽白血病病毒B亚群RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周S100A10 S100钙结合蛋白A10抗体 规格: 0.2ml
Streptococcus sui猪链球通用探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周LECT1 白细胞衍生化学吸引素抗体 规格: 0.2ml
Fructus gardeniae栀子染料法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周BAP135/TFII I 蛋白酪激BAP135抗体 规格: 0.2ml
鞭毛染色液(Leifson法)大鼠组织因子(TF)免疫试剂盒现货供应
豚鼠α干扰素(IFN-α)免疫试剂盒进口、组装
大鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)免疫试剂盒*直销
人组胺(HIS)免疫试剂盒进口、组装
大鼠层粘蛋白α1(LAMA1)免疫试剂盒进口、组装
人胃癌抗原MG7-Ag 免疫试剂盒进口、分装
鱼类三碘甲状腺原(T3)免疫试剂盒*直销
白G Fc片段(Fcγ)免疫试剂盒现货供应
营养V-B培养基(底层) 英文名称:minimum Nutritional V-B Medium 产品规格:250g
人解整合素样金属蛋白9(ADAM9)免疫试剂盒*直销
抗生素检定培养基1号(高pH) 英文名称:Antibiotic Agar 产品规格:250g
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)