非冻型组织 RNA 保存液250mL说明书实验要点 ：
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2．在适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能*抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的（*——=25:24:1），的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。非冻型组织RNA保存液 小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
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操作流程：
1． 非冻型组织 RNA 保存液250mL说明书根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×107细胞RNAwait的用量是1ml。加入RNAwait的原则是：量宁多勿少。建议在实际操作中不要称量组织，而直接根据目测结果加入RNAwait量，以加快操作和减少污染。例如5mm边长的立方体组织块，体积为125mm3=125µl，故应当加入1．25ml的RNAwait液。
2． 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中。
3． 快速将较大的组织切成厚度<0．5 cm的任意片状，较小的组织直接取下，立即*浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0．5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较大的组织可以切成厚度<0．5 cm的任意片状后保存，较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）则可以直接浸入RNAwait。
4． 将收集管存放于温度适当的地方，存放时间不能超过该温度下的长存放时间(请看技术指标)，如果要存放在-20℃或-80℃，需先将样品在4℃放置过夜后再转移到后的温度。注：将样品转移到-20℃或-80℃前，需要弃掉保护液。
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注意：
1. 非冻型组织 RNA 保存液250mL说明书对大肠杆菌可从固体培养基上挑取单个菌落直接进行煮沸法提取质粒DNA。
2. 煮沸法中添加*有一定限度,浓度高时,细菌裂解效果反而不好。有时不同*也能溶菌。 3. 提取的质粒DNA 中会含有RNA,但RNA 并不干扰进一步实验,如限制性内切酶消化,亚克隆及连接反应等。
