产品名称:霍乱弧菌通用PCR定量试剂盒
英文名称:Vibrio choleraePCR
产品分类:PCR检测试剂盒
产品规格:50次
普通PCR反应流程:
产品及特点
1.即开即用,用户只需要提供样品模板,操作简单,定量准确快速。
2.荧光定量 PCR 检测,反应特异性强。
3.提供阳性对照,便于分析实验结果。
4.PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳,本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
产品具有下列特点:
1. 改进了DOP-PCR的循环参数。
2. 优化的引物浓度,使自连序列和非模板相关序列的合成。
3. 可使用各种来源的样品,包括全血,干血,发根,口腔粘膜刮液培养细胞,真菌和病毒等。
4. 操作简便快捷,恒温(30℃)反应,无须PCR仪即可实现扩增。
5. 产物可用于多种后续试验,包括多重PCR、长片断PCR、定量PCR、克隆、文库构建、单倍型分析、测序、基因芯片分析、各种遗传分析(片段差异,微卫星差异,SNP,STR)等。
【储存条件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反复冻融,有效期6个月。
【适用仪器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等荧光定量PCR仪。
【样本采集、存放及运输】
u 样本采集:各类型样本按照常规方法采集;
u 存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可*保存,但应避免反复冻融(多冻融3次);
u 运输:采用或泡沫箱加冰密封进行运输。
【自备试剂】:
*,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini试剂盒,也可选择其他合适的核酸提取产品。
【使用方法】:
注:所有试剂使用前需*解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
CK ELISA Kit 猪胆囊收缩素/肠促*肽(CCK)ELISA试剂盒
进口/分装 Porcine Intestinal trefoil factor,ITF ELISA Kit 猪肠三叶因子(ITF)ELISA试剂盒
进口/分装 Porcine Activin A,ACV-A ELISA Kit 猪活化素A(ACV-A)ELISA试剂盒
进口/分装 swine major histocompatibility complexⅠ,MHCⅠ/SLAⅠ ELISA Kit 猪主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/SLAⅠ)ELISA试剂盒
进口/分装 Porcine Interferon β,IFN-β/IFNB ELISA Kit 猪β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA试剂盒
进口/分装 Porcine Orexin receptor,OXR ELISA Kit 猪食欲素受体(OXR)ELISA试剂盒
进口/分装 Porcine Orexin B,OX-B ELISA Kit 猪食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA试剂盒
进口/分装 Porcine Interleukin 1α ,IL-1α ELISA Kit 猪白介素1α(IL-1α)ELISA试剂盒
进口/分装 Porcine gastrin receptor,GsaR ELISA Kit 猪促胃液素受体(GsaR)ELISA试剂盒
进口/分装 Porcine growth hormone releasing peptide-Ghrelin,GHRP-Ghrelin ELISA Kit 猪生长激素释放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA试剂盒
进口/分装 Porcine Dexamethasone,Dex ELISA Kit 猪*(Dex)ELISA试剂盒
LISA试剂盒 进口/分装 Human anti-cardiolipin antibody IgA,ACA-IgA ELISA Kit
人抗心磷脂抗体IgM(ACA-IgM)ELISA试剂盒 进口/分装 Human anti-cardiolipin antibody IgM,ACA-IgM ELISA Kit
人抗心磷脂抗体IgG(ACA-IgG)ELISA试剂盒 进口/分装 Human anti-cardiolipin antibody IgG,ACA-IgG ELISA Kit
人抗高尔基体抗体(AGAA)ELISA试剂盒 进man Influenza viruses A,FLU A ELISA Kit
人单核细胞增多性李斯特菌素O((LLO)ELISA试剂盒 进口/分装 Human listeriolysin O,LLO ELISA Kit
人乙型肝炎病毒X抗原(HBxAg)ELISA试剂盒 进口/分装 Human hepatitis B 霍乱弧菌通用PCR定量试剂盒 virus X Ag,HBxAg ELISA Kit
人腺相关病毒(AAV)ELISA试剂盒 进口/分装
进口/分装 Porcine D-Dimer,D2D ELISA Kit 猪D二聚体(D2D)ELISA试剂盒
进口/分装 Porcine myeloperoxidase,MPO ELISA Kit