当前位置:上海抚生实业有限公司>>PCR快速检测试剂盒>>PCR-荧光探针法/PCR法>> 大豆源性成分快速检测试剂盒48T 0.2PCR管
货号 | FS-02R6434 |
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特点优势:
1. 特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
产品属性:
产品名称:大豆源性成分快速检测试剂盒48T 0.2PCR管 规格:48T 0.2PCR管 分类:PCR-荧光探针法 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。 |
试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔) 2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。 3、 样品稀释液:1×20ml。 4、 检测稀释液A:1×10ml。 5、 检测稀释液B:1×10ml。 |
实验过程:
一、试剂准备 1. DNA模板 2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步骤 1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。 2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。 3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。 |
使用方法:
一、稀释标准曲线样品(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。
1. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 模板稀释液,*用带芯枪头,下同)。
3. 在 7 号管中加入 5 μL 阳性对照(浓度为 1×10E8 拷贝/μL,试剂盒提供),充分震荡 1 分钟,得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品 DNA 的制备
7. 用自选方法纯化样品的 DNA,本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。
8. 如果有 N 个样品,则需要进行 N+2 个样品提取,多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。
三、设置 qPCR 反应(20μL 体系,在样品制备室进行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重复,则标记 N+9 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),6 个用于标准曲线。如果做定性分析,并且只做 1 次重复,则标记 N+4 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),1 个用于PCR 阳性对照。
4-(基硅基)吗啉 97%苝 98%可溶性FMS样酪氨激1检测试剂盒
3-基硅乙炔基吡啶 97%低形烧杯1101 50ml可溶性MHC-I链相关基因A检测试剂盒
(硅烷基)乙 98%双乙钠 99%可溶性MHC-I链相关基因B检测试剂盒
2-基硅乙炔基吡啶 97%亚钠 80%可溶性OX40配体检测试剂盒
3-硅烷基炔 97%1,2,4-三氮唑 99%可溶性P选择检测试剂盒
4-硅基-3-丁炔-2-酮 97%1,2,4-三氮唑 分析标准品可溶性sCD146分子检测试剂盒
5-基硅烷基-4-戊炔-1- 96%硫钕 SP可溶性生激表达基因2蛋白检测试剂盒
甲三甲酯 98%硫钕 99.99%可溶性Toll样受体6检测试剂盒
2-基硅乙炔基噻吩 97%化镨 99.99% metals basis可溶性T免疫球蛋白粘蛋白分子3检测试剂盒
乙烯基溴化镁 1.0M in THF化镨 99.9% metals basis可溶性白介2受体检测试剂盒
三磺镱 97%化铽,六水 99.9% metals basis可溶性白介6受体检测试剂盒
三磺锌 98%化铽,六水 99.999% metals basis可溶性白介7受体检测试剂盒
纤维 USP级二烷 96%可溶性白分化抗原14检测试剂盒
纤维 80~125mpa.s,25℃ 胡椒 CP,99.0%(易制品)可溶性白介6检测试剂盒
纤维 3400~5000mpa.s,25℃3'-氨基乙酮 97%可溶性白抗原G检测试剂盒
大豆源性成分快速检测试剂盒48T 0.2PCR管人抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)ELISA试剂盒,ATGA/TGAB ELISA二甲酰基-L-,无水磷化HER2受体抗体
人抗酿酒酵母抗体(ASCA)ELISA试剂盒,二甲酰基-L-,无水磷化HER2受体抗体
豚鼠单核趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA试剂盒,L-亮氨乙酯盐盐磷化HER3受体抗体
鱼类白介1αL-亮氨乙酯盐盐磷化HER4抗体
白介4(IL-4)ELISA试剂盒--动物,人L-亮氨乙酯盐盐磷化HER4抗体
白介3(IL-3)ELISA试剂盒--动物,人顺-5-降烯-外型-2,3-二甲酐转录因子ERF抗体
酵母粉琼脂顺-5-降烯-外型-2,3-二甲酐磷化转录因子ERF抗体
肠产培养基Ticagrelor真核肽链释放因子1抗体
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