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货号 | FS-01S63574 |
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商品介绍:
测定意义
DBE能够专一性地裂解支链淀粉的α-1,6糖苷键,产生线性的葡萄糖链,在调整支链淀粉分子的链长方面有重要的作用。
测定原理
采用3,5-二硝基水杨酸法测定DBE催化支链淀粉产生的还原糖,通过测定还原糖含量的变化来计算DBE活性。
需自备的的仪器和用品
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研钵、冰、蒸馏水
产品属性:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
DBE淀粉脱分支酶检测试剂盒可见分光光度法 | 可见分光光度法 | 50管/24样 | FS-01S63574 |
产品内容:
酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
碱性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 1.5mL×1 支,4℃保存
试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存,用时加入 1.6mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂四:粉剂×1 支,4 ℃保存,用时加入 1.9mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂五:液体 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
试剂六:液体 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
试剂七:自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。
NAD 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。
NADH 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。
操作步骤:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min;取上清 200uL,加入等体积碱性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 碱性提取液,煮沸 5min(盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
2、组织中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积碱性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 碱性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 碱性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
注意事项:
1、公司产品仅用于科研操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加,必须分开加。
2、反应过程要注意避光。
3、当吸光值大于 1 时,建议稀释后测量,计算公式中应当乘以稀释倍数。
下列是公司正在热销的产品:
大鼠CD163分子(CD163)联免疫试剂盒酿酒酵母EGR1 (44D5) Rabbit mAb
大鼠补体因子D(CFD)联免疫试剂盒 大肠埃希氏EPAC1 (5D3) Mouse mAb
大鼠干扰诱导Tα亚族趋化剂(I-TAC)联免疫试剂盒Acinetobacter toroneriEPAC2 (5B1) Mouse mAb
大鼠内皮糖蛋白(ENG)联免疫试剂盒蜡状芽孢杆PZR Antibody
大鼠脂肪结合蛋白1(FABP1)联免疫试剂盒瓜类炭疽盘孢*MTAP Antibody
大鼠脂肪型脂肪结合蛋白(FABP4)联免疫试剂盒 湘坪链霉DHX29 Antibody
大鼠白介1受体II(IL-1R2)联免疫试剂盒盐地杆Phospho-Glucocorticoid Receptor (Ser211) Antibody
大鼠白介1受体I(IL-1R1)联免疫试剂盒胡椒枯萎病Phospho-STING (Ser366) (D8K6H) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)
大鼠巨噬集落激因子(MCSF)联免疫试剂盒短小芽孢杆PIAS3 Antibody
大鼠白介22(IL-22)联免疫试剂盒嗜盐噬冷TRAF5 (D3E2R) Rabbit mAb
大鼠胰脂肪(PL)联免疫试剂盒 薛瓦酵母Pim-3 (D17C9) Rabbit mAb
大鼠白介12 p35(IL-12 p35)联免疫试剂盒小孢拟盘多毛孢Pim-3 (D17C9) Rabbit mAb
大鼠钙调结合蛋白(CALD)联免疫试剂盒 水稻节杆p38 MAPK (D13E1) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)
大鼠重肽铁蛋白(FTH)联免疫试剂盒胶孢EAAT1 Antibody
大鼠白介19(IL-19)联免疫试剂盒酿酒酵母GGA3 Antibody
DBE淀粉脱分支酶检测试剂盒可见分光光度法氧化铟 99.99% metals basis3-氯基二甲氧基硅烷 97%PCK(Human phosphoenolpyruvate carboxykinase) ELISA Kit 人磷烯式酮羧激
镍铝合金 48-50% Ni basis,50μmN,N-二 CP,98%Human trypsin ELISA Kit 人胰蛋白
镍铝合金粉 48-50% Ni basis,150μmN,N-二乙基 ARBACE1(Human Beta-site APP-Cleaving Enzyme 1) ELISA kit 人β位淀粉样前体蛋白裂解1
镍铝合金粉 48-50% Ni basis,20-40目N-乙基 99%PDI(Human Protein disulfide-isomerase precursor) ELISA Kit 人蛋白二硫化物异构前体
铂炭催化剂 Pt 10%靛红 Biological stainPDIA3(Human protein disulfide-isomerase A3) ELISA Kit 人蛋白二硫化物异构A3
钯碳 10%Pd靛红 ARSDH(Human sorbitol dehydrogenase) ELISA Kit 人山梨脱氢
铑碳催化剂 铑含量 (wt%) ,5%靛红 98%PPI(Human Peptidyl prolyl cis/trans isomerase) ELISA Kit 人肽基脯酰顺反异构
钌碳 Ru 5%L-乳 96%OCT(Human ornithine carbamoyl transferase) ELISA Kit 人鸟酰转移
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