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当前位置：上海抚生实业有限公司>>PCR快速检测试剂盒>>PCR-荧光探针法/PCR法>> 腰果源性成分快速检测试剂盒48T 0.2PCR管
| 货号 | FS-02R6444 |
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特点优势：
1. 特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
2. 重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3. 灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1：序列资源丰富，除公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
产品属性:
产品名称：腰果源性成分快速检测试剂盒48T 0.2PCR管 规格：48T 0.2PCR管 分类：PCR-荧光探针法 储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。 运输：低温、避光，快递免费送货上门。 |
试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔） 2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。 3、 样品稀释液：1×20ml。 4、 检测稀释液A：1×10ml。 5、 检测稀释液B：1×10ml。 |
实验过程：
一、试剂准备 1. DNA模板 2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步骤 1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。 2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。 3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。 |
使用方法:
一、稀释标准曲线样品（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。
1. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 模板稀释液，*用带芯枪头，下同）。
3. 在 7 号管中加入 5 μL 阳性对照（浓度为 1×10E8 拷贝/μL，试剂盒提供)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品 DNA 的制备
7. 用自选方法纯化样品的 DNA，本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。
8. 如果有 N 个样品，则需要进行 N+2 个样品提取，多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。
三、设置 qPCR 反应（20μL 体系，在样品制备室进行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重复，则标记 N+9 个 PCR 管，其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品，1 个用于 PCR 阴性对照（用水做模板），6 个用于标准曲线。如果做定性分析，并且只做 1 次重复，则标记 N+4 个 PCR 管，其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品，1 个用于 PCR 阴性对照（用水做模板），1 个用于PCR 阳性对照。
三乙烯 AR,99.0%蟾蜍 99%免疫球蛋白结合蛋白检测试剂盒
三乙烯 >99.5%(GC)N-琥珀酰亚基-N-甲基氨酯 97%免疫球蛋白轻链kappa抗体检测试剂盒
三乙烯 光谱纯, ≥99.5% (GC)(S)-(-)-1, 2, 4-丁三 98%免疫球蛋白轻链lambda检测试剂盒
四 AR,99.0%4-羟乙酰乙内酯 96%免疫抑制性糖蛋白检测试剂盒
四 ≥99.5% (GC)2--5-甲基吡啶 97%缪勒管抑制物质;抗缪勒管激检测试剂盒
四乙烯 GR，99.5%三唑酮 分析标准品，99.8%膜联蛋白-A1检测试剂盒
三乙二 75℃＋＋＋三唑酮膜联蛋白-A2检测试剂盒
正癸烷 99%五硫化二磷 99%,P≥27%末端补体复合物C5b-9检测试剂盒
1-乙酰基-4-(4-羟基基)哌 98%三异 95%囊虫病抗体检测试剂盒
2-氨基-3,4-二甲 98%腐植钠 CP脑啡肽检测试剂盒
2,8-双(三甲基)-4-羟基喹啉 99%腐植钠 AR脑钠;脑钠尿肽检测试剂盒
5-基酞 97%3-丁炔-1- 97%内检测试剂盒
2,2-二甲基戊二 98%4-苄氧基甲 98%内核心抗体检测试剂盒
3,4-二羟基 98%3-(二甲氨基)烯乙酯 98%内分泌腺来源的血管内皮生长因子检测试剂盒
4,4,4-三巴豆乙酯 98%十氢喹啉（顺式+反式） 98%内皮检测试剂盒
腰果源性成分快速检测试剂盒48T 0.2PCR管人抗中性粒抗体（ANA）ELISA试剂盒, ANA ELISA kit1-Trifluoromethylcyclopropane-1-carboxylicAcid雌激受体α抗体
人青少年2型血色沉着症/幼年型血色病相关蛋白2（HFE2）ELISA试剂盒,二乙基膦酰基乙叔丁酯内质网Aβ相关结合蛋白抗体
大鼠新生甲状腺（NN-T4）ELISA试剂盒,二乙基膦酰基乙叔丁酯Ephrin A2抗体
巨噬来源的趋化因子（MDC/CCL22）ELISA试剂盒--动物，人5-羟基烟大肠埃希菌菌体蛋白抗体
WORT 琼脂用于真菌,特别是酵母菌的计数和增菌培养（Merck方法）5-羟基烟雌激硫转移抗体
麦 康凯琼脂 用于肠道致病菌的选择性分离、培养（OXOID方法）5-羟基烟E Tag标签抗体
β-丙氨1,12-二氨基十二烷登革热病包膜糖蛋白E抗体
6,7-二甲氧基 6,7-Dimethylesculetin1,12-二氨基十二烷食道癌相关基因抗体
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