13524666654
当前位置：上海抚生实业有限公司>>PCR快速检测试剂盒>>PCR-荧光探针法/PCR法>> 芝麻源性成分快速检测试剂盒48T 0.1PCR管
| 货号 | FS-02R6429 |
|---|
特点优势：
1. 特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
2. 重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3. 灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1：序列资源丰富，除公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
产品属性:
产品名称：芝麻源性成分快速检测试剂盒48T 0.1PCR管 规格：48T 0.1PCR管 分类：PCR-荧光探针法 储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。 运输：低温、避光，快递免费送货上门。 |
试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔） 2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。 3、 样品稀释液：1×20ml。 4、 检测稀释液A：1×10ml。 5、 检测稀释液B：1×10ml。 |
实验过程：
一、试剂准备 1. DNA模板 2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步骤 1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。 2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。 3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。 |
使用方法:
一、稀释标准曲线样品（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。
1. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 模板稀释液，*用带芯枪头，下同）。
3. 在 7 号管中加入 5 μL 阳性对照（浓度为 1×10E8 拷贝/μL，试剂盒提供)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品 DNA 的制备
7. 用自选方法纯化样品的 DNA，本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。
8. 如果有 N 个样品，则需要进行 N+2 个样品提取，多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。
三、设置 qPCR 反应（20μL 体系，在样品制备室进行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重复，则标记 N+9 个 PCR 管，其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品，1 个用于 PCR 阴性对照（用水做模板），6 个用于标准曲线。如果做定性分析，并且只做 1 次重复，则标记 N+4 个 PCR 管，其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品，1 个用于 PCR 阴性对照（用水做模板），1 个用于PCR 阳性对照。
2-吡啶 97%水杨酯 CP绝经尿促性腺检测试剂盒
异烯溴化镁溶液 0.5 M THF溶液溴化 97%抗BP180抗体检测试剂盒
2-异氧基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂烷 98% USP/BP级抗DNAB抗体检测试剂盒
双(基硅烷基)氨基锂 95% 分析标准品抗IgE受体抗体检测试剂盒
6-甲基-2-吡啶 98%可可 99%抗α干扰抗体检测试剂盒
三磺汞 98%可可 分析标准品，≥99%抗β干扰抗体检测试剂盒
2-甲氧基基 97%铁 SP抗促甲状腺受体抗体检测试剂盒
N-甲基-N-基硅烷三乙酰 GC，≥98.5%铁 99.99% metals basis抗肺泡基底膜抗体检测试剂盒
N-甲基-N-基硅烷三乙酰 95%还原铁粉 AR，100目抗肝肾微粒体抗体检测试剂盒
炔甲酯 97%还原铁粉 CP，100目抗肝PF4复合物抗体;HIT抗体检测试剂盒
4-甲基-3-硝基吡啶 97%还原铁粉 98%，400目抗肝特异性脂蛋白抗体检测试剂盒
2-甲基-3-丁炔-2- 98%铁标准溶液1.19-1.35mg/L,用于水分析抗肝膜抗体检测试剂盒
3-甲氧基基 97%纳米铁粉 99.9%，50nm抗核抗体检测试剂盒
4-甲氧基基 97%纳米铁粉 99.9%，80nm抗核周因子抗体检测试剂盒
N-甲基-N-(基硅基)乙酰 97%乙酮 GCS,≥99.5% (GC)抗环瓜氨肽抗体检测试剂盒
芝麻源性成分快速检测试剂盒48T 0.1PCR管人糖聚糖（GAG）ELISA试剂盒,GAG ELISA2,5-二桥粒芯蛋白3抗体
人过氧化物体增殖因子活化受体γ（ PPAR-γ）ELISA试剂盒, PPAR-γ ELISA3,4-二癌基因删除蛋白2抗体
人白介受体相关激（IRAK）ELISA试剂盒,3,4-二DNA损伤诱导转录蛋白4抗体
人磷葡萄糖变位（PGM）ELISA试剂盒,3,4-二癌相关蛋白DRES17抗体
小鼠孕酮受体（PROGR）ELISA试剂盒,3,5-二周期调控蛋白SDP35抗体
大鼠抗髓鞘相关糖蛋白抗体（MAG Ab）ELISA试剂盒,3,5-二DNA损伤自噬调整蛋白抗体
mEC 肉汤3,5-二脑发育同源蛋白1抗体
Candida Elective 琼脂用于食品中Candida及酵母菌总数测定（Merck方法）3-(三甲基巯基）间粘附分子非整合蛋白3抗体
请输入账号
请输入密码
请输验证码
以上信息由企业自行提供，信息内容的真实性、准确性和合法性由相关企业负责，智慧城市网对此不承担任何保证责任。
温馨提示：为规避购买风险，建议您在购买产品前务必确认供应商资质及产品质量。
智慧城市网