2014年07月03日 07:57上海士锋生物科技有限公司点击量：1196
一、原理：维生素C具有化学还原性。2，6-二氯酚靛酚钠盐水溶液呈蓝色，在酸性环境中为玫瑰色，当其被还原时，则脱色。根据其各自性质，利用2，6，-二氯酚靛酚在酸性环境中滴定有维生素C的样品溶液。开始时，样品液中的维生素C立即将滴入的2，6-二氯酚靛酚还原脱色，当样品液中维生素全部被氧化时，再滴入2，6-二氯酚靛酚就不再被还原脱色而呈玫瑰色。故当样品液用2，6-二氯酚靛酚标准液滴定时，溶液出现浅玫瑰色时表明样品液中的维生素C全部被氧化，达到滴定终点。此时，记录滴定所消耗的2，6-二氯酚靛酚标准量，按下述计算出样品中还原型维生素C的含量。
二、材料与试剂
绿豆芽、10%盐酸溶液
2，6-二氯酚靛酚溶液：称取0.21g碳酸氢钠，0.26g2，6-二氯酚靛酚溶于250ml蒸馏水中，稀释至1000ml。过滤，装入棕色瓶内，置于冰箱中保存，不得超过3天。使用前用新配制的标准抗坏血酸溶液标定。取5ml标准抗坏血酸加入5ml偏磷酸-醋酸溶液。然后用2，6-二氯酚靛酚溶液的浓度，以每ml2,6-二氯酚靛酚溶液的浓度，以每毫升2，6-二氯酚靛酚溶液相当于抗坏血酸的mg数来表示。
标准抗坏血酸溶液：准确称取纯抗坏血酸结晶50mg溶于偏磷酸-醋酸溶液定容到250ml。装入棕色瓶中，储于冰箱内。
偏磷酸-醋酸溶液：称取偏磷酸15g，溶于40ml冰醋酸和450ml蒸馏水所配的混合液中。过滤。储于冰箱内，此液保存不得超过10天。
三、操作方法
1、制备含维生素C的样品提取液：称取30g绿豆芽置于研钵中研磨，放置片刻(约10分钟)，用2层纱布过滤，将滤液(如混浊可离心)滤入50ml容量瓶中。反复抽提2-3次，将滤液并入同一容量瓶中。zui后，用酸化的蒸馏水(每10ml蒸馏水加10%盐酸1滴)定容，混匀，备用。
2、维生素C含量的测定：量取样品提取液10ml于锥形瓶中。用微量滴定管，以2，6-二氯酚靛酚溶液滴定样品提取液，呈微弱的玫瑰色，持续5秒钟不褪为终点，记录所用2，6-二氯酚靛酚的ml数。整个滴定过程不要超过2分钟。另取10ml用10%盐酸酸化的蒸馏水做空白对照滴定。样品提取液和空白各做三份。
3、计算结果
维生素Cmg/100g样品=((VA-VB)×S)/W×100
VA为滴定样品提取液所用的2，6-二氯酚靛酚的平均ml数
VB为滴定空白对照所用的2，6-二氯酚靛酚的平均ml数
S为1ml2，6-二氯酚靛酚溶液相当于维生素C的mg数
W为10ml样品提取液中含样品的g数
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