2024年05月09日 09:18通派（上海）生物科技有限公司点击量：54
细胞：HLMVEC细胞
中文名称：人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞
生长特性：贴壁
培养基：1640 培养基 血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）
冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO
收到细胞后请尽快更换配套培养基，或自己配置的新鲜培养基（含15%血清），如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加10%的血清（原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时）。
HLMVEC细胞传代：
1）：细胞密度约80%时，吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加2~3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞（注意根据实际情况，把握消化时间）。
2）：镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时；
（可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处，即可肉眼可见细胞层脱落，或吹打后镜下观察吹打处，即消化完成，否则继续消化）
直接吸掉yi酶，加3~4ml 培养基，轻轻吹打细胞层，把细胞层吹落，吹散。
3）：取部分细胞悬液转移到新的培养皿中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。
4）：注意培养基PH值变化情况，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。
（网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；）
人类单倍体细胞系——每个细胞均只包含23条染色体的单个副本。为了生成这些细胞，研究人员借助了称作为CRISPR/Cas9的基因编辑技术。
（人SGC-7901细胞 来源：通派细胞库 人胃腺癌细胞）
由于缺少第二基因拷贝大大简化了基因失活，人类近单倍体细胞系成为了遗传筛查和基因组工程的重要工具。然而，一直以来缺乏人类单倍体细胞系，阻碍了对某些基因的遗传操控。（人HSF细胞 来源：通派细胞库 人皮肤成纤维细胞 ）
除15号染色体的一个30兆碱基(megabase)的杂合片段外，人类近单倍体细胞系HAP1包含了所有染色体的单个副本。这一大的片段具有330个基因，被整合到了19号染色体的长臂上。（小鼠P815细胞 来源：通派细胞库小鼠肥大细胞瘤细胞）
我们的手边拥有了这种近单倍体细胞系，但它包含的这一15号染色体大片段让我们感到非常困扰。这一片段达到了最小染色体的一半大小，因此是一个相当大的dna片段。
（人HSC细胞 人肝星状细胞 来源：通派细胞库）
希望能够除去这一添加在19号染色体中的DNA大片段，使得检测15号染色体上的基因功能变得更加的容易。利用二倍体细胞开展研究，如果你在一个拷贝的基因中导入突变，它的效应可以被另一个拷贝所掩盖；（HSG细胞 下颌下腺细胞 来源：通派细胞库）
为了除去这一跨越330个基因，近3000万个碱基对的遗传物质，研究人员转而借助了CRISPR/Cas9技术。设计出了一些引物，使得Cas9内切核酸酶靶向这一多余片段的任一末端；（HSY细胞 腮腺上皮细胞 来源：通派细胞库）
随后筛查了生成的细胞系——大约400个不同的克隆，找到了正确删除这一片段的细胞系。两个克隆符合期望的最终产物：生成了没有额外的15号染色体部分的单倍体细胞系。（人A2780细胞 人卵巢癌细胞 来源：通派细胞库）
对于那些试图阐明基因突变对于人类细胞影响的遗传学家们来说，这些单倍体细胞将很有用处。它还提供了第一个例子将CRISPR/Cas9系统用于这样大的DNA片段。
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