2024年05月08日 09:16通派（上海）生物科技有限公司点击量：12
细胞：HEK-a细胞
中文名称：人表皮角质细胞
生长特性：贴壁
培养基：1640 培养基 血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）
冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO
收到细胞后请尽快更换配套培养基，或自己配置的新鲜培养基（含15%血清），如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加10%的血清（原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时）。
HEK-a细胞传代：
1）：细胞密度约80%时，吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加2~3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞（注意根据实际情况，把握消化时间）。
2）：镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时；
（可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处，即可肉眼可见细胞层脱落，或吹打后镜下观察吹打处，即消化完成，否则继续消化）
直接吸掉yi酶，加3~4ml 培养基，轻轻吹打细胞层，把细胞层吹落，吹散。
3）：取部分细胞悬液转移到新的培养皿中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。
4）：注意培养基PH值变化情况，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。
（网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；）
这些迁移小体中还包括有很多直径约50-100nm的小泡。最终收缩纤维会发生断裂，从而这些迁移小体会释放到胞外并被周围的细胞吞噬。
（RGC-5细胞 来源：通派细胞库 RGC-5细胞信息）
通过密度梯度离心的方法得到了细胞裂解物的不同组分，比较发现migrasome富集在某一特定的组分中。
通过质谱的手段筛选了一系列migrasome特异性的蛋白，在大量膜蛋白与细胞骨架相关蛋白的候选物中，发现Tetraspanin-4(TSPAN4)是其中migrasome定位最准确的蛋白质，人工构建了(TSPAN4)-荧光报告基因供后续研究。
（人DLD-1细胞 来源：通派细胞库 人结直肠腺癌细胞）（人Siha细胞 来源：通派细胞库 人宫颈细胞）
当细胞密度很大时，TSPAN4在细胞内的分布十分弥散，只有在细胞膜上有少量富集;但是当细胞密度较低时，随着细胞收缩纤维的伸长，很多TSPAN4富集于收缩纤维区域，特别是其表面的环状结构。
（小鼠NIH 3T3细胞 来源：通派细胞库 小鼠成纤维细胞）（人Huvec细胞 来源：通派细胞库 人脐静脉内皮细胞）
通过比较共聚焦显微镜成像结果与电镜投射结果，证实了这部分"环状"的结构即之前发现的migrasome。
（人CNE-2细胞 来源：通派细胞库 人鼻咽癌细胞 ）
通过一系列药物处理，发现migrasome的形成依赖于细胞的迁移过程，而且依赖于细胞骨架蛋白actin的多聚化。体外过表达的实验与对动物组织的检测分别证明migrasome在各类细胞系以及原代细胞中是广泛存在的。
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