2023年07月12日 15:09上海恒远生物科技有限公司点击量：325
微生物为广泛分布于自然界中的一群肉眼看不到的微小生物，包括细菌、螺旋体、立克次体、衣原体、支原体、放线菌、真菌、病毒等类，其结构简单，以单细胞、细胞群体或非细胞状态存在，在提供营养物质和适宜环境的条件下，一般都能独立生活，迅速生长繁殖。为了避免微生物死亡、污染，保持其原有性状基本稳定，便于研究和使用，需要用到菌种保藏技术。菌种的保存主要是指通过降低细菌新陈代谢的速度, 使细菌的生命活动处于半yongjiu性休眠状态, 以达到长期保藏的目的以及减少菌种的更新需求来降低实验生产成本。微生物菌种的保存方法由于微生物种类的不同而略有差距，接下来给大家介绍一些常见的菌种保存的方法：
1.低温冷冻保藏法
该方法适合大多数需要长期保存的微生物，病毒等。原理为在超低温环境下时，微生物代谢活动停止，一般温度越低效果越好。使用冻存管对菌种进行保存，同时需要保护剂，一般使用甘油、脱脂羊粉或者二甲亚砜等保护剂。讲含有菌种的冻存管置于-60~-80℃冰箱中冷冻保存。
2.液体石蜡保藏法
液体石蜡保藏法适用于一些不能分解石蜡的菌类，例如酵母菌、芽孢杆菌属、青霉属、曲霉属等，一些细菌和真菌并不适合用该方法进行保存。液体石蜡法使用液体石蜡覆盖，微生物代谢被抑制，菌种老化推迟。石蜡法可以防止氧气进入，使得需氧菌无法继续生长，同时若培养基水分蒸发，容易导致细菌死亡，石蜡法可防止培养基水分蒸发，延长菌种保存时间。无菌条件下将灭菌的液体石蜡注入刚培养好的斜面培养物上，液面高出斜面顶端1cm~2cm，加胶塞并用固体石蜡封口，使菌种与空气隔绝。将注人石蜡油的菌种斜面直立存放于低温（4℃~6℃）干燥处或室温下保存。
3.冷冻干燥保藏法
该方法适合大多数微生物的保存，但不适用于不产孢子的丝状真菌。冷冻干燥保藏法是在低温、干燥、缺氧条件下保藏菌种。即在低温条件下快速地将菌种冻结，使微生物保持完整，然后减压抽直空使冰升华直至脱水干燥，并在直空状态密封隔绝空气，使微生物代谢活动停止，得以长期保藏。按照一定配方配置保护剂加入安瓿管，然后再加入菌种制备成菌悬液。先将安瓿管进行预冻存至-15~-20℃，然后用冷冻真空干燥机对安瓿管进行干燥，并将安瓿管进行熔封。（低温避光保存）
4.沙土管保藏法
该方法适合用于产孢类放线菌、芽孢杆菌等的保存，不适合以菌丝发育为主的真菌和病原性真菌的保藏。使用细沙土创造干燥条件，使那些能够产生孢子或芽孢的微生物在干燥环境中的代谢活动减缓，抑制其繁殖速度，且抵抗力强不易死亡。该方法能减少菌株突变，延长存活时间。将河、海沙用60目过筛，弃去大颗粒及杂质，再用80目过筛，去掉细沙。用吸铁石吸去铁质，放入容器中用10%盐酸浸泡，如河沙中右机物较多可用20%盐酸浸泡。24h后倒去盐酸，用自来水浸泡数次至中性，将沙子烘于或晒干。另取未被污染的地表以下十壤用100日讨筛，自来水洗至中性，烘干。按沙：土=2：1混合均匀，分装人安瓿管或小试管中，高度为1cm左右，塞好棉塞，121℃高压灭菌1~1.5h，或常压间歇灭菌3次、每天每次16。在50℃以下烘干（温度不宜过高，影响菌种性能），经检查无微生物生长方可使用。之后制备菌悬液并将菌悬液加入沙土管中。讲含有菌悬液的沙土管放入真空干燥器中进行真空干燥。使用火焰封融管口，存放于低温（4℃~10℃）或常温干燥处，定期检查活力及杂菌情况。
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