2022年04月13日 13:20广州健仑生物科技有限公司点击量：841
1、仪器：均质器 、振荡器、离心机、刻度移液管、天平（感量0.01g）。
2、微量移液器：单道20µl-200µl，100µl-1000µl。
3、试剂：甲醇，正己烷。
样本准备：
1、样本处理前须知：实验器具必须洁净并使用一次性吸头，以避免污染干扰实验结果。
2、配液：配液1：样本提取液 70%甲醇，即V甲醇:V去离子水=7:3。
3、样本前处理步骤：
3.1 谷物、饲料
1）称取2g粉碎样本于离心管中，再根据不同的检出限要求按下表加入样本提取液
| 检测下限 | 10ppb | 20ppb | 40ppb | 100ppb |
| 样本提取液 | 2ml | 4ml | 8ml | 20ml |
振荡5分钟，室温4000转/分离心5分钟。
2）取0.1ml上清，加入0.4ml去离子水，混匀备用。
3.2谷物、饲料（须吹干）
若要求检测下限为5ppb时，可按如下操作：
1）称取2g粉碎样本于离心管中，加入4ml样本提取液，振荡5分钟，室温4000转/分离心5分钟；
2）取1ml上层液体在50-60℃条件下用氮气或空气吹干；
3）先加入0.25ml 70%甲醇溶解剩下的残留物，剧烈震荡2分钟；再加入1ml去离子水，混匀备用。（注意：这一步甲醇与水的加液顺序不能颠倒）
稀释倍数：2.5倍 检测下限：5ppb
3.3粮油（菜油、麻油、色拉油、花生油等）
1）称取2g样本于离心管中，再根据不同的检出限要求按下表加入样本提取液
| 检测下限 | 10ppb | 20ppb | 40ppb | 100ppb |
| 样本提取液 | 2ml | 4ml | 8ml | 20ml |
然后加入8ml正己烷，振荡5分钟，室温4000转/分离心5分钟。
2）去除上层液体，取0.1ml下层液体加入0.4ml去离子水，混匀备用。
实验步骤：
1、 撕开检测卡铝箔包装袋，取出检测卡，放于平整、洁净的台面上。
2 、用配套吸管吸取已准备好的样本液体，缓慢、逐滴的（应避免泡沫产生）滴加4-5滴（约150ul）到加样孔（S）内。
3 、室温下放置5-8分钟判断结果，超过30分钟的结果无效。
结果判断：
1.阴性：在观察孔内，只有对照线区（C）出现一条紫红色线。
2.阳性：在观察孔内，检测线区（T）及对照线区（C）同时出现紫红色线。抗体滴度越高，检测线（T）颜色越深。
3.失效：在观察孔内，对照线区（C）不出现紫红色线。(注: 去离子水、自来水、生理盐水不能作为阴性对照。)
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