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48T人腮腺炎抗体IgGELISA 检测试剂盒

2012年08月02日 14:59研域(上海)化学试剂有限公司点击量:544

人腮腺炎抗体IgGELISA 检测试剂盒            

本试剂仅供研究使用  标本:血清或血浆

试验原理:
    Mumps-IgG试剂盒是间接法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知Mumps-IgG浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将Mumps-IgG和*标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中Mumps-IgG的浓度呈比例关系。

自备材料
蒸馏水。
加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
振荡器及磁力搅拌器等。

安全性
避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

人腮腺炎抗体IgGELISA 检测试剂盒 

操作注意事项
试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

样品收集、处理及保存方法
血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液
保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。

人腮腺炎抗体IgGELISA 检测试剂盒 

操作步骤
使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的*标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
在450nm波长处测定各孔的OD值。

6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到的结果。

试剂盒性能
1. 灵敏度:zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。

人腮腺炎抗体IgGELISA 检测试剂盒 

结 果 判 断 与 分 析
1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的Mumps-IgG标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的Mumps-IgG含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

3、检测值范围:0-40IU/L

4、敏感度: 0.1 IU/L

D-myo-Inositol 肌醇 [87-89-8] 500g
Inulin from chicory 菊粉 [9005-80-5] 100g
Iodic acid 碘酸 [7782-68-5] 100g
Iodine 碘 [7553-56-2] 100g
Isoquercitrin 异槲皮苷 [21637-25-2] 100mg
Isorhamnetin 异鼠李素 [480-19-3] 100mg
Isovanillin 异* [621-59-0] 50g
Janus Green B 健那绿 [2869-83-2] 25g
Iodine bromide 一溴化碘 [7789-33-5] 100g
Iodine chloride 一氯化碘 [7790-99-0] 25g
Iodine pentoxide 五氧化二碘 [12029-98-0] 25g
Iodine trichloride 三氯化碘 [865-44-1] 100g
Iodoacetamide 碘乙酰胺 [144-48-9] 5g
Iodoacetamide 碘乙酰胺 [144-48-9] 25g
Iodoacetamide 碘乙酰胺 [144-48-9] 5g
Iodoacetamide 碘乙酰胺 [144-48-9] 30g
Iodoacetic acid 碘乙酸 [64-69-7] 25g
Iodoacetic acid, sodium salt 碘乙酸钠 [305-53-3] 5g
Iodoacetyl LC Biotin / 100mg
Iodobenzene 碘代苯 [591-50-4] 10g
3-Iodobenzoic acid 3-碘苯甲酸 [618-51-9] 10g
4-Iodobenzoic acid 4-碘苯甲酸 [619-58-9] 10g
Lysostaphin 溶葡球菌酶, [9011-93-2] 1mg
5-Iodo-2’-deoxycytidine 5-碘 2’-脱氧胞苷 [611-53-0] 250mg
5-Iodo-2’-deoxycytidine 5-碘 2’-脱氧胞苷 [611-53-0] 1g
5-Iodo-2’-deoxyuridine 5-碘 2’-脱氧尿苷 [54-42-2] 1g
4-Iodophenoxyacetic acid 4-碘苯氧基乙酸 [1878-94-0] 25g
4-[3-(4-Iodophenyl)-2-(2,4-dinitrophenyl)-2H-5-tetrazolio]-1,3-benzenedisulfonate sodium salt 水性四氮唑-3 (2-(4-碘苯基)-3-(2,4-二硝基苯基)-5-苯基-3H-四唑鎓-2',4'-二磺酸钠盐) IPB [161617-45-4] 100mg
2-(4-Iodophenyl)-3-(4-nitrophenyl)-5-(2,4-disulfophenyl)-2H-tetrazolium sodium salt 水溶性四氮唑-1;2-(4-碘苯)-3-(4-硝基苯)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四氮唑钠盐 [150849-52-8] 100mg
1-Iodopropane 碘代正丙烷 [107-08-4] 25ml
2-Iodopropane 2-碘丙烷 [75-30-9] 25ml
Jenner’s stain 哲纳尔氏染色素 [62851-42-7] 25g
Kaempferol 山奈酚 [520-18-3] 250mg
Kallikrein * / 250mg
N-Iodosuccinimide N-碘代丁二酰亚胺 [516-12-1] 25g
4-Iodotoluene 对碘甲苯 [624-31-7] 50g
Strongly acidic styrene type cation exchange resin -001X7 通用性强酸性阳离子交换树脂,钠型 / 500g

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