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干细胞注意事项

2017年08月28日 14:01上海邦景实业有限公司点击量:362

干细胞注意事项
⒈ 正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。
⒉ 在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
⑴ 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。当前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
⑵ 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
⑶ 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法"(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
⑷ 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是当前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
干细胞HOF    人卵巢成纤维细胞    5 x 10^5 cells/vial
HAMSC    人羊膜间充质基质细胞    5 x 10^5 cells/vial
HCMSC    人绒毛膜间充质基质细胞    5 x 10^5 cells/vial
HMSC-bm    人骨髓间充质干细胞    5 x 10^5 cells/vial
HMSC-ad    人脂肪间充质干细胞    5 x 10^5 cells/vial
HMSC-hp    人肝脏间充质干细胞    5 x 10^5 cells/vial
HUMSC    人脐带间充质干细胞    5 x 10^5 cells/vial
HPMSC    人肺间充质干细胞    5 x 10^5 cells/vial
HVMSC    人脊柱间充质干细胞    5 x 10^5 cells/vial
HUVEC    人脐静脉内皮细胞    5 x 10^5 cells/vial
HUAEC    人脐动脉内皮细胞    5 x 10^5 cells/vial
HUVSMC    人脐静脉平滑肌细胞    5 x 10^5 cells/vial
HUASMC    人脐动脉平滑肌细胞    5 x 10^5 cells/vial
RPC    大鼠垂体细胞    5 x 10^5 cells/vial
RMC    大鼠脑膜细胞    5 x 10^5 cells/vial
RN-r    大鼠脑脊神经元    1 x 10^6 cells/vial
RN-c    大鼠皮质神经元    1 x 10^6 cells/vial
RGC    大鼠颗粒细胞    1 x 10^6 cells/vial
RN-h    大鼠海马神经元    1 x 10^6 cells/vial
RN-sn    大鼠黑质神经元    1 x 10^6 cells/vial
RN-s    大鼠纹状体神经元    1 x 10^6 cells/vial
RN-vsc    大鼠腹脊髓神经元    1 x 10^6 cells/vial
RN-dsc    大鼠背脊髓神经元    1 x 10^6 cells/vial
ROPC    大鼠少突胶质前体细胞    5 x 10^5 cells/vial
RSC    大鼠雪旺细胞    5 x 10^5 cells/vial
RPNF    大鼠周神经成纤维细胞    5 x 10^5 cells/vial
RA    大鼠星形胶质细胞    5 x 10^5 cells/vial
RA-c    大鼠小脑星形胶质细胞    5 x 10^5 cells/vial
RA-h    大鼠海马趾星形胶质细胞    5 x 10^5 cells/vial
RM    大鼠小胶质细胞    5 x 10^5 cells/vial
RLF    大鼠淋巴成纤维细胞    5 x 10^5 cells/vial
RPAEpiC    大鼠肺泡上皮细胞    5 x 10^5 cells/vial
RRTEpiC    大鼠肾小管上皮细胞    5 x 10^5 cells/vial
RHSteC    大鼠肝星形细胞    5 x 10^5 cells/vial
RCM    大鼠心肌细胞    1 x 10^6 cells/vial
RMSC    大鼠间充质干细胞-骨髓    5 x 10^5 cells/vial
MPC    小鼠垂体细胞    5 x 10^5 cells/vial干细胞

 

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