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上海博研生物提供优质“PLC/PRF/5细胞,人原发性肝癌细胞",进口来源,保证活性,有任何质量问题均可免费退换,咨询,!
博研生物*供应优质PLC/PRF/5细胞,人原发性肝癌细胞(*),公司以有影响力的销售方式吸引广大科研工作者的购买,不光买的放心、安心,同时在技术指导方面给予客户力所能及的支持。:
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产品特点:活性好、存活率高、实验成果特征明显
产品来源:进口来源
产品运输:免费快递
产品包装:瓶装
产品用途:细胞培养研究,科研用。
PLC/PRF/5细胞,人原发性肝癌细胞(*)传代方法:细胞*汇合时,倒掉旧液,加入消化液(0.25%*+0.03%EDTA)2ml消化,显微镜下观察细胞*脱离瓶壁分离成单个细胞后弃掉*,加培养基混匀分瓶,T25瓶中加培养基至6-8ml,T75瓶加培养基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培养。
邮购备注: 收到细胞后,请镜下观察细胞,用恰当方式处理细胞。若有悬浮的细胞,请离心收集细胞,接种到一个新的培养瓶中。使用新鲜配制的培养基,使用进口胎牛血清,刚接到细胞时血清浓度可以在15%。
细胞培养方法
1、收到细胞,请查看瓶子是否有破裂,培养基是否漏出,是否浑浊,如有请尽快。
2、收到细胞,如包装完好,请在显微镜下观察细胞。,由于运输过程中的问题,细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来,显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况,出现此状态时,请不要打开细胞培养瓶,应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止3-5小时左右,让细胞先稳定下,再于显微镜下观察,此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。如细胞仍不能贴壁,请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理
3. 收到细胞时如无异常情况 ,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养基吸出,留下 5-10ML培养基继续培养:超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液,1000转/分钟离心3分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
4,将培养瓶置于37℃培养箱中培养,盖子微微拧松。吸出的培养基可以保存在灭菌过的瓶子里,存放于4℃冰箱,以备不时之需。
5 、24小时后,细胞形态已恢复并贴满瓶壁,就可以传代了。(贴壁细胞)将培养瓶里的培养基倒去,加3-5ml(以能覆盖细胞生长面为准)PBS或Hanks’液洗涤后弃去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的*消化,消化时间以具体细胞为准,一般1-3分钟,不超过5分钟。可以放入37℃培养箱消化。轻轻晃动瓶壁,见细胞脱落下来,加入3-5ml培养基终止消化。用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之*脱落,然后将溶液吸入离心管内离心,1000rpm/5min。弃上清,视细胞数量决定分瓶数,一般一传二,如细胞量多可一传三,有些细胞不易传得过稀,有些生长较快的细胞则可以多传几瓶,以具体细胞和经验为准。(悬浮细胞)用移液管轻轻吹打瓶壁,直接将溶液吸入离心管离心即可。
6,贴壁细胞 ,悬浮细胞。严格无菌操作。换液时,换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液,37度 5%CO2 培养
7. 收到细胞后,请镜下观察细胞,用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多,请离心收集细胞,接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液,使用新鲜配制的培养基,使用进口胎牛血清. 刚接到细胞,若细胞不多时 血清浓度可以加到15%去培养。若细胞迏到80%左右 ,血清浓度还是在10%。
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