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PC-3M 2B4细胞，前列腺癌细胞低转移亚系

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更新时间：2017-02-25 11:53:16浏览次数：428次

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产品简介

“PC-3M 2B4细胞，前列腺癌细胞低转移亚系"品质保障，咨询，我们将竭诚为您服务，细胞一周质保，出现任何质量问题可免费包换。！

详细介绍

产品名称：PC-3M 2B4细胞，前列腺癌细胞低转移亚系

基本特性：
细胞数量：100万个细胞数
细胞传代：到客户手上是3代以内的

细胞周期的DNA检测

　　Ⅰ、样品准备　准备以下一种或几种样品

　　A、组织单细胞悬浮液（如淋巴腺、脾、骨髓、胎盘细胞）

B、组织培养细胞

　　C、Ficoll-hypaque分离的单核细胞

　　Ⅱ、反应体系－DNA低渗缓冲液

　　柠檬酸三钠 0.25g

　　Triton-X 100 0.75ml

　　Propidium iodide 0.025g

　　核糖核酸酶　0.005g

　　蒸馏水　250ml

　　我们将该DNA低渗溶液于密闭瓶子中存放数月后并无发现有任何染色活性的丢失

　　Ⅲ、染色

　　1、每一个管子中放入1×106个细胞；

　　2、样品离心后尽可能*地移去上清液，并且不要打碎沉淀块；　　 3、入1ml的DNA低渗染色（可用甲基绿进行染色）缓冲液至沉淀中，并混匀；

　 4、样品于4℃下避光30分钟或zui长不超过1个小时以备流式细胞仪分析。　

　注意：延长在低渗缓冲液的曝光时间会引起样品碎片的增加。

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下面是有关细胞株，菌株培养的具体无菌技术：
1. 实验进行前，无菌室及无菌操作台（laminar flow）以紫外灯照射30-60 分钟灭菌，以70 % ethanol 擦拭无菌操作台面，并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70 % ethanol 擦拭无菌操作台面。操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后，再进行下一个细胞株的操作。
2. 无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如试管架、吸管、吸取器或吸管盒等可以暂时放置，其它实验用品用完即应移出，以利于气流之流通。实验用品以70 % ethanol 擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在台面的*无菌区域，勿在边缘的非无菌区域操作。
3. 小心取用无菌的实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或容器瓶口，亦不要在打开的容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45° 角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。
4. 工作人员应注意自身的安全，须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒感染的细胞株应特别小心操作，并选择适当等级的无菌操作台（至少Class II）。操作过程中，应避免引起aerosol 的产生，小心毒性药品，例如DMSO 及TPA 等，并避免尖锐针头的伤害等。
5. 定期检测下列项目：
5.1. CO2 钢瓶的CO2 压力
5.2. CO2 培养箱的CO2 浓度、温度、及水盘是否有污染（水盘的水用无菌水，每周更换）。
5.3. 无菌操作台内的airflow 压力，定期更换紫外线灯管及HEPA 过滤膜，预滤网（300小时/预滤网，3000 小时/HEPA）。
6. 水槽可添加消毒剂（Zephrin 1:750），定期更换水槽的水.

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